原代細胞實驗步驟:
以胚胎小鼠為例 1.取材:將孕鼠拉頸椎處死,投入75%酒精浸泡數(shù)秒,提出孕鼠控掉酒精,放置于蠟盤中用大頭針固定。用手術器械逐層分離皮膚和肌肉組織,打開腹腔。注意不同的解剖層次使用不同的器械。后取出雙角置于無菌平皿內。 2.用Hanks液洗滌3次,剪開取出胚胎。血液和筋膜等組織。 3.用彎頭剪把胚胎盡量剪碎,每個組織塊小于1mm3。在操作時應盡量將平皿蓋半蓋住平皿以防空氣中塵埃落下污染組織。再用Hanks液洗滌2~3次,自然沉淀。用吸管吸去上清液。以下可按兩種方法進行,即消化法和組織塊培養(yǎng)法。 4.若使用消化法,則將組織塊放人三角燒瓶內加入10~30mL0.125%胰蛋白酶,37℃磁力攪拌消化20多min。然后加入少量血清終止消化。用幾層無菌紗布過濾。取過濾液,800r/min離心5~10min收集細胞。棄上清,加入帶有雙抗的培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。 注:細胞分離的方法各實驗室不同,所采用的消化酶也不相同(如膠原酶,透明質酶等)。 5.若進行組織塊培養(yǎng),則不做步驟4,加入幾滴血清于組織塊中,再用彎頭吸管將組織塊懸液吸起。在一小培養(yǎng)瓶中逐個鋪展開,注意將瓶底涂抹均勻。將瓶子翻轉倒置后在37℃培養(yǎng)箱內放置2-3h。待組織塊微干與瓶壁粘牢后再輕輕將瓶子翻轉過來,從邊角加入4~5mL培養(yǎng)基,使細胞接觸到培養(yǎng)基,放培養(yǎng)箱內繼續(xù)進行培養(yǎng)。
鴨胚胎成纖維細胞
組織來源
胚胎組織
貨號
P-X2316
產(chǎn)品規(guī)格
5×105
生長特性
貼壁
產(chǎn)品類別
鴨原代細胞
細胞形態(tài)
長梭狀細胞
細胞詳述:
近年來,有關干細胞的研究是生物技術領域的熱點之一。胚胎成纖維細胞具有相對容易獲得,增殖能力強等特點,因此胚胎成纖維細胞常作為哺乳動物干細胞培養(yǎng)的飼養(yǎng)層細胞,主要分泌謀學細胞因子,如成纖維細胞生長因子,白血病抑制因子等,以促進干細胞增殖及抑制分化。
該細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶SV40基因。
細胞特性:
1) 細胞來源于實驗動物正常胚胎組織。
2) 細胞鑒定:波形蛋白(Vimentin)熒光染色為陽性。
3) 經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5) 細胞生長方式:長梭狀細胞,貼壁培養(yǎng)。
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EBPL
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單克隆抗體
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注意事項:
1.收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。