使用范圍: 本產(chǎn)品于科學研究實驗使用、不得用于其它。
產(chǎn)品貨號
P-X1949
產(chǎn)品規(guī)格
5×105
組織來源
脊髓組織
生長特性
貼壁
細胞形態(tài)
神經(jīng)元細胞樣
產(chǎn)品類別
小鼠原代細胞
傳代特性
屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群
用途
僅供科研
細胞簡介:
小鼠脊髓神經(jīng)元細胞分離自脊髓組織;脊髓是細細的管束狀的神經(jīng)結(jié)構(gòu),位于脊柱的椎管內(nèi)且被脊椎保護;是源自腦的神經(jīng)系統(tǒng)延伸部分。神經(jīng)系統(tǒng)的細胞依靠復(fù)雜的聯(lián)系來處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經(jīng)信息。人和脊椎動物神經(jīng)系統(tǒng)的一部分,在椎管里面,上端連接延髓,兩旁發(fā)出成對的神經(jīng),分布到四肢、體壁和內(nèi)臟。脊髓的內(nèi)部有一個H形(蝴蝶型)灰質(zhì)區(qū),主要由神經(jīng)細胞構(gòu)成;在灰質(zhì)區(qū)周圍為白質(zhì)區(qū),主要由有髓神經(jīng)纖維組成;脊髓是許多簡單反射的。脊髓兩旁發(fā)出許多成對的神經(jīng)(稱為脊神經(jīng))分布到全身皮膚、肌肉和內(nèi)臟器官。脊髓是周圍神經(jīng)與腦之間的通路,也是許多簡單反射活動的低級。按脊神經(jīng)的出入可把脊髓也分為相應(yīng)的31節(jié),31對脊神經(jīng)就是由不同的脊椎發(fā)出的。神經(jīng)系統(tǒng)基本的結(jié)構(gòu)和功能單位是神經(jīng)元,即神經(jīng)細胞,其大小和外觀在神經(jīng)系統(tǒng)中差異很大。但都具有胞體和樹突、軸突。胞體又叫核周體,內(nèi)含神經(jīng)絲、微管、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、游離核糖體和一個有明顯核仁的核。一些大神經(jīng)元突起的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)可用Nissl染色顯示,在光鏡下是灰藍色斑塊狀,稱為尼氏小體。樹突和軸突是神經(jīng)元的突起,能在神經(jīng)元之間傳遞電沖動,突起的大小和形態(tài)各不相同,很難用常規(guī)的顯微鏡鑒別。脊髓組織內(nèi)含有大量膠質(zhì)細胞,神經(jīng)元含量少,分離純化難度大,且脊髓神經(jīng)元細胞是高度分化的終末細胞,不能分裂增殖,培養(yǎng)要求高。剛接種的脊髓神經(jīng)元呈圓形,體積小,透亮,無突起。培養(yǎng)2-3d,可見胞體增大,突起增多延長;培養(yǎng)6-7d,細胞體大飽滿,突起明顯增加延長并交織成網(wǎng),光暈明顯,立體感強。培養(yǎng)20d后,死亡細胞明顯增加,細胞出現(xiàn)內(nèi)空泡,突起粗細不均,甚至脫壁,發(fā)生細胞崩解。
公司實驗室分離的小鼠脊髓神經(jīng)元細胞采用膠原酶&胰酶聯(lián)合消化法、神經(jīng)元培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結(jié)合化學試劑抑制法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
公司實驗室分離的小鼠脊髓神經(jīng)元細胞經(jīng)β-Tubulin熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 神經(jīng)元細胞樣
傳代特性 屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
相關(guān)產(chǎn)品:
人椎間盤纖維環(huán)細胞 Human primary intervertebral disc annulus fibrosus cells
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雜交瘤細胞株;3H3F6
原代細胞實驗步驟:
以胚胎小鼠為例 1.取材:將孕鼠拉頸椎處死,投入75%酒精浸泡數(shù)秒,提出孕鼠控掉酒精,放置于蠟盤中用大頭針固定。用手術(shù)器械逐層分離皮膚和肌肉組織,打開腹腔。注意不同的解剖層次使用不同的器械。后取出雙角置于無菌平皿內(nèi)。 2.用Hanks液洗滌3次,剪開取出胚胎。血液和筋膜等組織。 3.用彎頭剪把胚胎盡量剪碎,每個組織塊小于1mm3。在操作時應(yīng)盡量將平皿蓋半蓋住平皿以防空氣中塵埃落下污染組織。再用Hanks液洗滌2~3次,自然沉淀。用吸管吸去上清液。以下可按兩種方法進行,即消化法和組織塊培養(yǎng)法。 4.若使用消化法,則將組織塊放人三角燒瓶內(nèi)加入10~30mL0.125%胰蛋白酶,37℃磁力攪拌消化20多min。然后加入少量血清終止消化。用幾層無菌紗布過濾。取過濾液,800r/min離心5~10min收集細胞。棄上清,加入帶有雙抗的培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。 注:細胞分離的方法各實驗室不同,所采用的消化酶也不相同(如膠原酶,透明質(zhì)酶等)。 5.若進行組織塊培養(yǎng),則不做步驟4,加入幾滴血清于組織塊中,再用彎頭吸管將組織塊懸液吸起。在一小培養(yǎng)瓶中逐個鋪展開,注意將瓶底涂抹均勻。將瓶子翻轉(zhuǎn)倒置后在37℃培養(yǎng)箱內(nèi)放置2-3h。待組織塊微干與瓶壁粘牢后再輕輕將瓶子翻轉(zhuǎn)過來,從邊角加入4~5mL培養(yǎng)基,使細胞接觸到培養(yǎng)基,放培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)進行培養(yǎng)。
注意事項:
1.收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。
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Listeria tropina
豬鈣/鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶2δ(CAMK2D)elisa檢測試劑盒
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