狗腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞
組織來(lái)源
小腸組織
貨號(hào)
P-X2310
產(chǎn)品規(guī)格
5×105
生長(zhǎng)特性
貼壁
產(chǎn)品類(lèi)別
狗原代細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)
上皮樣 多角形細(xì)胞
細(xì)胞詳述：
小腸位于腹中，上端接 幽門(mén) 與胃相通，下端通過(guò)闌門(mén)與大腸相連。小腸與心互為表里。是食物消化吸收的主要場(chǎng)所，盤(pán)曲于腹腔內(nèi)，上連胃幽門(mén)，下接 盲腸 ，全長(zhǎng)約5－6米，張開(kāi)有半個(gè)籃球大，分為十二指腸、空腸和回腸三部分。
微血管內(nèi)皮細(xì)胞呈單層覆蓋于微血管表面，構(gòu)成血管內(nèi)外物質(zhì)交換的一種重要屏障，是循環(huán)血流動(dòng)力和血液中危險(xiǎn)因素的主要靶點(diǎn)。
1） 組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常小腸組織。
2) 細(xì)胞鑒定：vWF熒光染色為陽(yáng)性。
3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5) 細(xì)胞生長(zhǎng)方式：上皮樣，多角形細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
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原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：
以胚胎小鼠為例 1．取材：將孕鼠拉頸椎處死，投入75%酒精浸泡數(shù)秒，提出孕鼠控掉酒精，放置于蠟盤(pán)中用大頭針固定。用手術(shù)器械逐層分離皮膚和肌肉組織，打開(kāi)腹腔。注意不同的解剖層次使用不同的器械。后取出雙角置于無(wú)菌平皿內(nèi)。 2．用Hanks液洗滌3次，剪開(kāi)取出胚胎。血液和筋膜等組織。 3．用彎頭剪把胚胎盡量剪碎，每個(gè)組織塊小于1mm3。在操作時(shí)應(yīng)盡量將平皿蓋半蓋住平皿以防空氣中塵埃落下污染組織。再用Hanks液洗滌2~3次，自然沉淀。用吸管吸去上清液。以下可按兩種方法進(jìn)行，即消化法和組織塊培養(yǎng)法。 4．若使用消化法，則將組織塊放人三角燒瓶?jī)?nèi)加入10~30mL0.125%胰蛋白酶，37℃磁力攪拌消化20多min。然后加入少量血清終止消化。用幾層無(wú)菌紗布過(guò)濾。取過(guò)濾液，800r/min離心5~10min收集細(xì)胞。棄上清，加入帶有雙抗的培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。 注：細(xì)胞分離的方法各實(shí)驗(yàn)室不同，所采用的消化酶也不相同（如膠原酶，透明質(zhì)酶等）。 5．若進(jìn)行組織塊培養(yǎng)，則不做步驟4，加入幾滴血清于組織塊中，再用彎頭吸管將組織塊懸液吸起。在一小培養(yǎng)瓶中逐個(gè)鋪展開(kāi)，注意將瓶底涂抹均勻。將瓶子翻轉(zhuǎn)倒置后在37℃培養(yǎng)箱內(nèi)放置2－3h。待組織塊微干與瓶壁粘牢后再輕輕將瓶子翻轉(zhuǎn)過(guò)來(lái)，從邊角加入4~5mL培養(yǎng)基，使細(xì)胞接觸到培養(yǎng)基，放培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。
注意事項(xiàng)：
1.收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。
GCS1
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