使用范圍:
本產(chǎn)品于科學(xué)研究實(shí)驗(yàn)使用、不得用于其它。
組織來源
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腦組織
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貨號
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P-X1969
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產(chǎn)品規(guī)格
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5×105
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生長特性
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貼壁
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產(chǎn)品類別
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小鼠原代細(xì)胞
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細(xì)胞形態(tài)
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不規(guī)則細(xì)胞
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細(xì)胞詳述:
在嚴(yán)重創(chuàng)傷應(yīng)激急性期,邊緣系統(tǒng)為應(yīng)激應(yīng)答敏感區(qū),其功能和應(yīng)激聯(lián)系密切,杏仁核是邊緣系統(tǒng)中重要的皮質(zhì)下核團(tuán),在創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙發(fā)病中起重要作用。
海馬萎縮是由于海馬神經(jīng)元凋亡,致體積減小,杏仁核和海馬的功能密切相關(guān),海馬的部分功能可由杏仁核的調(diào)節(jié)而實(shí)現(xiàn)。神經(jīng)元是構(gòu)成神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能的基本單位。神經(jīng)元具有長突起,由細(xì)胞體和細(xì)胞突起構(gòu)成。
細(xì)胞特性:
1)組織來源于實(shí)驗(yàn)動物的正常腦組織。本細(xì)胞為終末分化細(xì)胞,增殖能力很弱,建議客戶收到細(xì)胞后直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn),不要進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng)。
2)細(xì)胞鑒定:β-tubulin熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式:不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基:
我們推薦使用 Delf原代神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)體系
作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
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原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟:
以胚胎小鼠為例
1.取材:將孕鼠拉頸椎處死,投入75%酒精浸泡數(shù)秒,提出孕鼠控掉酒精,放置于蠟盤中用大頭針固定。用手術(shù)器械逐層分離皮膚和肌肉組織,打開腹腔。注意不同的解剖層次使用不同的器械。后取出雙角置于無菌平皿內(nèi)。
2.用Hanks液洗滌3次,剪開取出胚胎。血液和筋膜等組織。
3.用彎頭剪把胚胎盡量剪碎,每個組織塊小于1mm3。在操作時應(yīng)盡量將平皿蓋半蓋住平皿以防空氣中塵埃落下污染組織。再用Hanks液洗滌2~3次,自然沉淀。用吸管吸去上清液。以下可按兩種方法進(jìn)行,即消化法和組織塊培養(yǎng)法。
4.若使用消化法,則將組織塊放人三角燒瓶內(nèi)加入10~30mL0.125%胰蛋白酶,37℃磁力攪拌消化20多min。然后加入少量血清終止消化。用幾層無菌紗布過濾。取過濾液,800r/min離心5~10min收集細(xì)胞。棄上清,加入帶有雙抗的培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
注:細(xì)胞分離的方法各實(shí)驗(yàn)室不同,所采用的消化酶也不相同(如膠原酶,透明質(zhì)酶等)。
5.若進(jìn)行組織塊培養(yǎng),則不做步驟4,加入幾滴血清于組織塊中,再用彎頭吸管將組織塊懸液吸起。在一小培養(yǎng)瓶中逐個鋪展開,注意將瓶底涂抹均勻。將瓶子翻轉(zhuǎn)倒置后在37℃培養(yǎng)箱內(nèi)放置2-3h。待組織塊微干與瓶壁粘牢后再輕輕將瓶子翻轉(zhuǎn)過來,從邊角加入4~5mL培養(yǎng)基,使細(xì)胞接觸到培養(yǎng)基,放培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?,故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時需出示收到細(xì)胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要后方能丟棄。
5.客戶在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,有任何問題可聯(lián)系我們在線客服。
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