使用范圍:
本產(chǎn)品于科學(xué)研究實(shí)驗(yàn)使用、不得用于其它。
組織來(lái)源
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膽管組織
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貨號(hào)
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P-X1298
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產(chǎn)品規(guī)格
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5×105
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生長(zhǎng)特性
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貼壁
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產(chǎn)品類別
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人原代細(xì)胞
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細(xì)胞形態(tài)
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上皮樣 多角形細(xì)胞
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細(xì)胞詳述:
膽管,輸送膽汁的管道。由肝分泌的膽汁,經(jīng)肝左、右管、肝總管、膽囊管進(jìn)入膽囊貯存,肝內(nèi)膽管的部分包括:左、右肝管;左內(nèi)葉、左外葉、右前葉、右后葉膽管;各肝段膽管;小葉間膽管;毛細(xì)膽管。
常見(jiàn)的膽管病變?nèi)缒懙篱]塞、原發(fā)性硬化性膽管炎、膽管癌等,都是以膽管上皮為病變靶位,因此研究膽管上皮細(xì)胞的生物學(xué)特性和病理變化有重要意義。在這些病變過(guò)程中,肝內(nèi)膽管上皮常暴露于常暴露于較高炎癥因子中,會(huì)表現(xiàn)細(xì)胞損傷和繼發(fā)性增值為特征的病理變化。
細(xì)胞特性:
1) 細(xì)胞來(lái)源于人正常膽管組織。
2) 細(xì)胞鑒定:細(xì)胞角蛋白19(CK-19)熒光染色為陽(yáng)性。
3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5) 細(xì)胞生長(zhǎng)方式:上皮樣,多角形細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基:
我們推薦使用 Delf原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)體系
作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
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原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟:
以胚胎小鼠為例
1.取材:將孕鼠拉頸椎處死,投入75%酒精浸泡數(shù)秒,提出孕鼠控掉酒精,放置于蠟盤中用大頭針固定。用手術(shù)器械逐層分離皮膚和肌肉組織,打開(kāi)腹腔。注意不同的解剖層次使用不同的器械。后取出雙角置于無(wú)菌平皿內(nèi)。
2.用Hanks液洗滌3次,剪開(kāi)取出胚胎。血液和筋膜等組織。
3.用彎頭剪把胚胎盡量剪碎,每個(gè)組織塊小于1mm3。在操作時(shí)應(yīng)盡量將平皿蓋半蓋住平皿以防空氣中塵埃落下污染組織。再用Hanks液洗滌2~3次,自然沉淀。用吸管吸去上清液。以下可按兩種方法進(jìn)行,即消化法和組織塊培養(yǎng)法。
4.若使用消化法,則將組織塊放人三角燒瓶?jī)?nèi)加入10~30mL0.125%胰蛋白酶,37℃磁力攪拌消化20多min。然后加入少量血清終止消化。用幾層無(wú)菌紗布過(guò)濾。取過(guò)濾液,800r/min離心5~10min收集細(xì)胞。棄上清,加入帶有雙抗的培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
注:細(xì)胞分離的方法各實(shí)驗(yàn)室不同,所采用的消化酶也不相同(如膠原酶,透明質(zhì)酶等)。
5.若進(jìn)行組織塊培養(yǎng),則不做步驟4,加入幾滴血清于組織塊中,再用彎頭吸管將組織塊懸液吸起。在一小培養(yǎng)瓶中逐個(gè)鋪展開(kāi),注意將瓶底涂抹均勻。將瓶子翻轉(zhuǎn)倒置后在37℃培養(yǎng)箱內(nèi)放置2-3h。待組織塊微干與瓶壁粘牢后再輕輕將瓶子翻轉(zhuǎn)過(guò)來(lái),從邊角加入4~5mL培養(yǎng)基,使細(xì)胞接觸到培養(yǎng)基,放培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。
2.收到細(xì)胞先不開(kāi)瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過(guò)程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐WC客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問(wèn)題后客服人員溝通的時(shí)間證明,期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要后方能丟棄。
5.客戶在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,有任何問(wèn)題可聯(lián)系我們?cè)诰€客服。
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