原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：
以胚胎小鼠為例 1．取材：將孕鼠拉頸椎處死，投入75%酒精浸泡數(shù)秒，提出孕鼠控掉酒精，放置于蠟盤(pán)中用大頭針固定。用手術(shù)器械逐層分離皮膚和肌肉組織，打開(kāi)腹腔。注意不同的解剖層次使用不同的器械。后取出雙角置于無(wú)菌平皿內(nèi)。 2．用Hanks液洗滌3次，剪開(kāi)取出胚胎。血液和筋膜等組織。 3．用彎頭剪把胚胎盡量剪碎，每個(gè)組織塊小于1mm3。在操作時(shí)應(yīng)盡量將平皿蓋半蓋住平皿以防空氣中塵埃落下污染組織。再用Hanks液洗滌2~3次，自然沉淀。用吸管吸去上清液。以下可按兩種方法進(jìn)行，即消化法和組織塊培養(yǎng)法。 4．若使用消化法，則將組織塊放人三角燒瓶?jī)?nèi)加入10~30mL0.125%胰蛋白酶，37℃磁力攪拌消化20多min。然后加入少量血清終止消化。用幾層無(wú)菌紗布過(guò)濾。取過(guò)濾液，800r/min離心5~10min收集細(xì)胞。棄上清，加入帶有雙抗的培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。 注：細(xì)胞分離的方法各實(shí)驗(yàn)室不同，所采用的消化酶也不相同（如膠原酶，透明質(zhì)酶等）。 5．若進(jìn)行組織塊培養(yǎng)，則不做步驟4，加入幾滴血清于組織塊中，再用彎頭吸管將組織塊懸液吸起。在一小培養(yǎng)瓶中逐個(gè)鋪展開(kāi)，注意將瓶底涂抹均勻。將瓶子翻轉(zhuǎn)倒置后在37℃培養(yǎng)箱內(nèi)放置2－3h。待組織塊微干與瓶壁粘牢后再輕輕將瓶子翻轉(zhuǎn)過(guò)來(lái)，從邊角加入4~5mL培養(yǎng)基，使細(xì)胞接觸到培養(yǎng)基，放培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。
人胃平滑肌細(xì)胞
組織來(lái)源
胃組織
貨號(hào)
P-X1287
產(chǎn)品規(guī)格
5×105
生長(zhǎng)特性
貼壁
產(chǎn)品類(lèi)別
人原代細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)
長(zhǎng)梭狀細(xì)胞
細(xì)胞詳述：
胃是人體的消化器官，位于膈下，胃壁由黏膜、黏膜下層、肌層和外膜四層組成，并有神經(jīng)、血管和管的分布。其中平滑肌主要位于肌層中，胃的肌層發(fā)達(dá)，由內(nèi)斜、中環(huán)和外縱三層平滑肌構(gòu)成。其中，中層環(huán)形平滑肌在幽門(mén)處增厚，形成幽門(mén)括約肌，具有節(jié)制胃內(nèi)容物排出的作用。
胃動(dòng)力性的發(fā)生與平滑肌的收縮性的改變密切相關(guān)，現(xiàn)已有充分證據(jù)說(shuō)明， Cajal間質(zhì)細(xì)胞是胃部運(yùn)動(dòng)的起搏細(xì)胞，它存在于環(huán)形肌與縱行肌之間，并緊靠肌間神經(jīng)叢；同時(shí)Ca2+在平滑肌的收縮中起著重要的信使作用，這些都是胃動(dòng)力性研究中的重要方向。
細(xì)胞特性：
1） 細(xì)胞來(lái)源于人正常胃組織。
2) 細(xì)胞鑒定：平滑肌肌動(dòng)蛋白（α-SMA）熒光染色為陽(yáng)性。
3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5) 細(xì)胞生長(zhǎng)方式：長(zhǎng)梭狀細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
我們推薦使用 Delf原代平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
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人胃平滑肌細(xì)胞C9orf59
注意事項(xiàng)：
1.收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。