原代細胞實驗步驟:
以胚胎小鼠為例 1.取材:將孕鼠拉頸椎處死,投入75%酒精浸泡數(shù)秒,提出孕鼠控掉酒精,放置于蠟盤中用大頭針固定。用手術(shù)器械逐層分離皮膚和肌肉組織,打開腹腔。注意不同的解剖層次使用不同的器械。后取出雙角置于無菌平皿內(nèi)。 2.用Hanks液洗滌3次,剪開取出胚胎。血液和筋膜等組織。 3.用彎頭剪把胚胎盡量剪碎,每個組織塊小于1mm3。在操作時應盡量將平皿蓋半蓋住平皿以防空氣中塵埃落下污染組織。再用Hanks液洗滌2~3次,自然沉淀。用吸管吸去上清液。以下可按兩種方法進行,即消化法和組織塊培養(yǎng)法。 4.若使用消化法,則將組織塊放人三角燒瓶內(nèi)加入10~30mL0.125%胰蛋白酶,37℃磁力攪拌消化20多min。然后加入少量血清終止消化。用幾層無菌紗布過濾。取過濾液,800r/min離心5~10min收集細胞。棄上清,加入帶有雙抗的培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。 注:細胞分離的方法各實驗室不同,所采用的消化酶也不相同(如膠原酶,透明質(zhì)酶等)。 5.若進行組織塊培養(yǎng),則不做步驟4,加入幾滴血清于組織塊中,再用彎頭吸管將組織塊懸液吸起。在一小培養(yǎng)瓶中逐個鋪展開,注意將瓶底涂抹均勻。將瓶子翻轉(zhuǎn)倒置后在37℃培養(yǎng)箱內(nèi)放置2-3h。待組織塊微干與瓶壁粘牢后再輕輕將瓶子翻轉(zhuǎn)過來,從邊角加入4~5mL培養(yǎng)基,使細胞接觸到培養(yǎng)基,放培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)進行培養(yǎng)。
人附睪平滑肌細胞
組織來源
附睪組織
貨號
P-X1381
產(chǎn)品規(guī)格
5×105
生長特性
貼壁
產(chǎn)品類別
人原代細胞
細胞形態(tài)
長梭形 不規(guī)則細胞
細胞詳述:
附睪是一個多數(shù)曲折、細小的管子構(gòu)成的器官,一面連接著輸精管,一面連接著睪丸的曲細精管。當精子離開睪丸時,就跑到附睪里,繼續(xù)生長成熟。附睪管除貯存精子外還能分泌附睪液,其中含有某些、酶和特異的營養(yǎng)物質(zhì),它們有助于精子的成熟。附睪管由黏膜、肌層和外膜組成。其中,肌層主要是由平滑肌細胞構(gòu)成。
細胞特性:
1)組織來源于人的正常附睪組織。
2)細胞鑒定:α-SMA熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細胞生長方式:長梭形,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
我們推薦使用 Delf原代平滑肌細胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
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DSCC1蛋白抗體
絲氨酸蛋白酶抑制劑B1抗體 Anti-SERPINB1
Phospho-ELk1 (Thr417)
著絲粒相關(guān)蛋白NSL1抗體
磷酸化細胞轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗體
DSCC1
早老素蛋白-1抗體 Anti-presenilin 1/PS-1
NSL1
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酪酪肽抗體 Anti-Peptide YY/PYY
9號染色體開放閱讀框57抗體
人附睪平滑肌細胞C9orf57
注意事項:
1.收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。