人扁桃體動脈平滑肌細胞
組織來源
扁桃體組織
貨號
P-X1350
產(chǎn)品規(guī)格
5×105
生長特性
貼壁
產(chǎn)品類別
人原代細胞
細胞形態(tài)
上皮樣 多角形細胞
細胞詳述:
扁桃體是一對扁卵圓形的器官,位于扁桃體窩內(nèi)。按其位置分別稱為腭扁桃體、咽扁桃體和舌扁桃體。其中,腭扁桃體大,通常所說的扁桃體即為腭扁桃體。
腭扁桃體我為多源性血供器官,主要的營養(yǎng)動脈分別為腭升動脈、面動脈和咽升動脈。血管發(fā)生和發(fā)展的一個主要因素使由于血管平滑肌細胞轉(zhuǎn)變成為了具有繁殖能力的表型。
1)細胞來源于人正常扁桃體組織。
2)細胞鑒定:平滑肌肌動蛋白(α-SMA)熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細胞生長方式:上皮樣,多角形細胞,貼壁培養(yǎng)。
我們推薦使用 Delf原代平滑肌細胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
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原代細胞實驗步驟:
以胚胎小鼠為例 1.取材:將孕鼠拉頸椎處死,投入75%酒精浸泡數(shù)秒,提出孕鼠控掉酒精,放置于蠟盤中用大頭針固定。用手術(shù)器械逐層分離皮膚和肌肉組織,打開腹腔。注意不同的解剖層次使用不同的器械。后取出雙角置于無菌平皿內(nèi)。 2.用Hanks液洗滌3次,剪開取出胚胎。血液和筋膜等組織。 3.用彎頭剪把胚胎盡量剪碎,每個組織塊小于1mm3。在操作時應(yīng)盡量將平皿蓋半蓋住平皿以防空氣中塵埃落下污染組織。再用Hanks液洗滌2~3次,自然沉淀。用吸管吸去上清液。以下可按兩種方法進行,即消化法和組織塊培養(yǎng)法。 4.若使用消化法,則將組織塊放人三角燒瓶內(nèi)加入10~30mL0.125%胰蛋白酶,37℃磁力攪拌消化20多min。然后加入少量血清終止消化。用幾層無菌紗布過濾。取過濾液,800r/min離心5~10min收集細胞。棄上清,加入帶有雙抗的培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。 注:細胞分離的方法各實驗室不同,所采用的消化酶也不相同(如膠原酶,透明質(zhì)酶等)。 5.若進行組織塊培養(yǎng),則不做步驟4,加入幾滴血清于組織塊中,再用彎頭吸管將組織塊懸液吸起。在一小培養(yǎng)瓶中逐個鋪展開,注意將瓶底涂抹均勻。將瓶子翻轉(zhuǎn)倒置后在37℃培養(yǎng)箱內(nèi)放置2-3h。待組織塊微干與瓶壁粘牢后再輕輕將瓶子翻轉(zhuǎn)過來,從邊角加入4~5mL培養(yǎng)基,使細胞接觸到培養(yǎng)基,放培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)進行培養(yǎng)。
注意事項:
1.收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。
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