一抗操作步驟：
一抗的操作步驟主要包括封閉、?一抗孵育和洗滌。?
封閉：?這一步驟的目的是為了防止非特異性的蛋白質(zhì)結(jié)合位點(diǎn)與抗體結(jié)合，?從而引起非特異的染色和背景。?通常使用惰性蛋白質(zhì)或非離子去污劑來(lái)封閉膜上的未結(jié)合位點(diǎn)，?以降低抗體的非特異性結(jié)合。?常用的封閉試劑有5%的BSA或脫脂奶粉，?緩沖液一般選擇PBST或TBST。?封閉條件通常為室溫或37℃緩慢搖動(dòng)1～2小時(shí)，?特殊情況也可4℃過(guò)夜。?封閉完成后需要進(jìn)行洗膜，?以去除膜上未結(jié)合的封閉試劑。?
一抗孵育：?在一抗孵育之前，?需要參考一抗的說(shuō)明書(shū)，?按照適當(dāng)比例用封閉液稀釋一抗。?吸盡封閉液后，?立即加入稀釋好的一抗，?室溫或4℃在搖床上緩慢搖動(dòng)孵育1～2小時(shí)。?如果一抗孵育一小時(shí)效果不佳，?可以在4℃緩慢搖動(dòng)孵育過(guò)夜。?然后回收一抗，?加入Western洗滌液，?在搖床上緩慢搖動(dòng)洗滌5-10分鐘，?共洗滌3次。?如果結(jié)果背景較高，?可以適當(dāng)延長(zhǎng)洗滌時(shí)間并增加洗滌次數(shù)。?
洗滌：?洗滌的目的是為了洗去一抗的非特異性結(jié)合，?洗滌的效果直接影響結(jié)果背景的深淺。?建議使用PBST或TBST作為洗滌液，?其中的Tween20有助于去除非特異性的結(jié)合，?減少背景。?洗滌的次數(shù)和時(shí)間根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)來(lái)確定，?建議清洗3-5次，?每次5分鐘。
細(xì)胞角蛋白3抗體
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貨號(hào)
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規(guī)格
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價(jià)格
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用途
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BJ006602
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50ul
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1380
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僅供科研實(shí)驗(yàn)
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BJ006602
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100ul
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2380
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僅供科研實(shí)驗(yàn)
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BJ006602
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200ul
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3480
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僅供科研實(shí)驗(yàn)
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商品屬性：
英文名稱：Cytokeratin 3
中文名稱：細(xì)胞角蛋白3抗體
別 名；65 kDa cytokeratin; CK-3; CK3; Cytokeratin-3;
K2C3_HUMAN; K3; Keratin 3; Keratin; Keratin type II cytoskeletal 3; Keratin-3;
KRT3; type II cytoskeletal 3; Type-II keratin Kb3.
研究領(lǐng)域；細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞骨架
抗體來(lái)源；Rabbit
克隆類型；Polyclonal
交叉反應(yīng)；Human, (predicted: Mouse, Rat, )
產(chǎn)品應(yīng)用；ELISA=1:5000-10000
IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 （石蠟切片需做抗原修復(fù)）
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理論分子量；64kDa
細(xì)胞定位；細(xì)胞漿 細(xì)胞外基質(zhì) 分泌型蛋白
性 狀；Liquid
濃 度；1mg/ml
免 疫 原；KLH conjugated synthetic
peptide derived from human Cytokeratin 3: 41-140/628
亞 型；IgG
純化方法；affinity purified by Protein A
保存條件；Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事項(xiàng)；This product as supplied is
intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic
applications.
抗體注意事項(xiàng)：
確定抗體的名字和特性：?注意抗體的中英文名字、?它名、?亞型等信息，?這些信息對(duì)于選擇正確的抗體至關(guān)重要。?
明確實(shí)驗(yàn)類型：?了解你的實(shí)驗(yàn)類型（?如ELISA、?WB、?IHC、?ICC或FACS）?，?因?yàn)榭贵w的說(shuō)明書(shū)通常會(huì)列出該抗體經(jīng)驗(yàn)證過(guò)的實(shí)驗(yàn)類型。?如果說(shuō)明書(shū)沒(méi)有提及某種應(yīng)用類型，?并不意味著該抗體不適用于該實(shí)驗(yàn)，?只是表示尚未經(jīng)過(guò)該實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。?
選擇適當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)樣本種屬：?確定你的實(shí)驗(yàn)樣本是來(lái)自人類、?小鼠還是大鼠等，?因?yàn)榭贵w的說(shuō)明書(shū)會(huì)列出該抗體經(jīng)試驗(yàn)驗(yàn)證過(guò)的物種。?
考慮樣本蛋白的結(jié)構(gòu)性質(zhì)：?了解樣本蛋白的結(jié)構(gòu)性質(zhì)有助于選擇的抗體，?特別是當(dāng)樣本蛋白在提取和處理過(guò)程中可能會(huì)變性時(shí)，?這會(huì)影響抗體的親和反應(yīng)。?
單多克隆抗體的選擇：?單克隆抗體特異性強(qiáng)但親和力相對(duì)小，?而多克隆抗體特異性稍弱但親和力強(qiáng)。?根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇合適的抗體。?
注意抗體的特異性：?原的類型對(duì)抗體對(duì)靶蛋白的特異性有顯著影響。?應(yīng)選擇針對(duì)已充分表征的原產(chǎn)生的抗體，?避免使用不合適或質(zhì)量差的原產(chǎn)生的抗體。?
封閉液的選擇：?封閉液的選擇應(yīng)根據(jù)抗體說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，?常用的封閉液包括脫脂奶粉和BSA。?封閉液的目的是封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn)，?降低背景噪音3。?
抗體孵育注意事項(xiàng)：?使用干凈的孵育盒子，?避免油脂等雜物沾到膜上造成非特異信號(hào)。?如果一次性需要檢測(cè)多個(gè)蛋白，?可以考慮將膜剪開(kāi)或采用其他技術(shù)如抗體洗脫液處理后再次使用膜
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