商品介紹:
測(cè)定意義:
PEPCK(EC 4.1.1.32)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和細(xì)胞中,催化草酰乙酸轉(zhuǎn)化為磷酸烯醇式丙酮酸,是調(diào)節(jié)糖異生途徑的關(guān)鍵酶。
測(cè)定原理:
PEPCK催化草酰乙酸**磷酸烯醇式丙酮酸和CO2,丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶進(jìn)一步依次催化NADH氧化**NAD+,在340nm下測(cè)定NADH下降速率,即可反映PEPCK活性。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
儀器:
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動(dòng)生化分析儀(比色測(cè)定波長(zhǎng)為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺(tái)式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
生化法檢測(cè)試劑盒:分光光度法、微量法、比色法、酶標(biāo)法、高液相色譜法,自主**,技術(shù)**團(tuán)隊(duì),操作簡(jiǎn)便快捷,規(guī)格合理、系列成套,價(jià)格合理,是廣大科研工作者的好選擇。
產(chǎn)品名稱
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測(cè)定方法
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規(guī)格
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貨號(hào)
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磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)生化試劑盒50管/48樣
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紫外分光光度法
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50管/48樣
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BJ-01611373-50管/48樣
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特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見(jiàn)區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn)。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致公認(rèn)是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來(lái)說(shuō),其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
雄烯酮(ADT)ELISA試劑盒 Androsterone(ADT)ELISA Kit
雄烯二醇(AED)ELISA試劑盒 Androstenediol(AED)ELISA Kit
雄誘導(dǎo)蛋白1(AIG1)ELISA試劑盒 Androgen Induced Protein 1(AIG1)ELISA Kit
胸腺因子(TF)ELISA試劑盒 Thymic Factor(TF)ELISA Kit
胸腺旁腺素(PTMS)ELISA試劑盒 Parathymosin(PTMS)ELISA Kit
胸腺激活調(diào)節(jié)趨化因子(TARC)ELISA試劑盒 Thymus Activation Regulated Chemokine(TARC)ELISA Kit
胸腺表達(dá)趨化因子(TECK)ELISA試劑盒 Thymus Expressed Chemokine(TECK)ELISA Kit
胸腎表達(dá)趨化因子(BRAK)ELISA試劑盒 Breast And Kidney Expressed Chemokine(BRAK)ELISA Kit
胸苷酸合成酶(TYMS)ELISA試劑盒 Thymidylate Synthetase(TYMS)ELISA Kit
胸苷嘧啶DNA糖基化酶(TDG)ELISA試劑盒 Thymine DNA Glycosylase(TDG)ELISA Kit
磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)生化試劑盒50管/48樣STAT3抑制劑(Cryptotanshinone)Cryptotanshinone1mL(10mM)|10mg|50mg
HDAC抑制劑(Quisinostat)Quisinostat1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
液泡V-ATP酶抑制劑(Bafilomycin A1)Bafilomycin A11mL(10mM)|100ug|1mg|5mg
ATM抑制劑(KU-55933)KU-559331mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
NF-κB抑制劑(JSH-23)JSH-231mL(10mM)|5mg|10mg
PRMT5酶活性抑制劑(EPZ015666)EPZ0156661mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
BET溴區(qū)抑制劑(I-BET151)BET bromodomain inhibitor1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
不可逆抑制劑(Pentostatin)Pentostatin1mL(10mM)|10mg|50mg
TGFβR-1和ALK5抑制劑(RepSox)RepSox1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
Syk抑制劑(GS-9973)GS-99731mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
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