操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)允瓜♂尯蟮臉悠贩显噭┖械臋z測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
生化法檢測(cè)試劑盒:分光光度法、微量法、比色法、酶標(biāo)法、高液相色譜法,自主**,技術(shù)**團(tuán)隊(duì),操作簡(jiǎn)便快捷,規(guī)格合理、系列成套,價(jià)格合理,是廣大科研工作者的好選擇。
產(chǎn)品名稱
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測(cè)定方法
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規(guī)格
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貨號(hào)
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葡萄糖6磷酸(6PG)生化試劑盒50管/24樣
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可見(jiàn)分光光度法
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50管/24樣
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BJ-01611171-50管/24樣
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商品介紹:
測(cè)定意義:
6PG (Glucose-6-phosphate,葡萄糖-6-磷酸,又稱6-磷酸葡萄糖),是糖酵解和磷酸戊糖途徑的中間產(chǎn)物,廣泛存在于動(dòng)植物體和微生物中。在糖酵解的**步反應(yīng)中,葡萄糖被己糖激酶催化**葡萄糖-6-磷酸,然后通過(guò)磷酸葡萄糖異構(gòu)酶的催化形成果糖-6-磷酸,以繼續(xù)糖酵解的其它步驟;而在戊糖磷酸途徑中,葡萄糖-6-磷酸是其**個(gè)底物,該過(guò)程也是**NADPH的主要途徑。此外,葡萄糖-6-磷酸也能轉(zhuǎn)化形成糖原或淀粉而被儲(chǔ)存起來(lái)。
測(cè)定原理:
6-磷酸葡萄糖脫氫酶可催化6PG和NADP+**6磷酸葡萄糖酸和NADPH,NADPH在1-mPMS的作用下使WST-8顯橙黃色,在450 nm下測(cè)定吸光值。
儀器:
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動(dòng)生化分析儀(比色測(cè)定波長(zhǎng)為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺(tái)式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見(jiàn)區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn)。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致公認(rèn)是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來(lái)說(shuō),其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速
NVP-TAE 684 ALK抑制劑(NVP-TAE 684) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
植物根系活力定性檢測(cè)液(TTC法) 2×100ml|2×500ml
Sofosbuvir impurity M HCVRNA復(fù)制抑制劑(PSI-7977) 1mL(10mM)|1mg|5mg
Nonesterified Free fatty acids assay kit 游離脂肪酸測(cè)試盒(酶法,雙試劑)(微板法) 96T
Ro 10-5824 dihydrochloride dopamine D4受體部分激動(dòng)劑 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
Tenovin-6 SIRT1/SIRT2抑制劑(Tenovin-6) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
Regadenoson A2A腺苷受體激動(dòng)劑(Regadenoson) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg
MGL-3196 THR-β激動(dòng)劑(MGL-3196) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
kobe2602 H-Ras·GTP與c-Raf-1RBD結(jié)合抑制劑(kobe2602) 1mL(10mM)|50mg|100mg|250mg
CPI-360 EZH2抑制劑(CPI-360) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
GSK461364 Polo-like kinase1抑制劑 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
Neuraminidase Assay Kit 唾液酸酶檢測(cè)試劑盒(神經(jīng)氨酸酶檢測(cè)試劑盒) 100次
Isorhamnetin Isorhamnetin 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg
Blocking Buffer(PBS) 封閉液(用PBS配置,含吐溫20) 100ml
葡萄糖6磷酸(6PG)生化試劑盒50管/24樣豬α干擾素(IFN-α)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 RBE(膽管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
大鼠內(nèi)皮脂肪酶(EL)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 RBL-2H3(大鼠嗜堿性細(xì)胞白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
牛支原體ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 RD(惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
人肺炎衣原體抗體(Cpn-Ab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 RF/6A(猴視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
人尿微量白蛋白(ALB)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 RH-35(大鼠肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
人周期素依賴性激酶4(CDK-4)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 RKO(結(jié)腸腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 RL95-2(**內(nèi)膜癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
豬藍(lán)耳病抗體(PRRS-Ab)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 RM-1(小鼠前列腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 RSC96(大鼠雪旺細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
人谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(GSTs)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 S-180(小鼠肉瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
人1,5-脫水葡萄糖醇/1,5-脫水山梨(1,5-AG)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 RWPE1(前列腺上皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
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