商品介紹:
測(cè)定意義
磷酸戊糖途徑(PPP)是細(xì)胞還原力NADPH的主要來(lái)源。PPP途徑中6PGDH和葡萄糖6-磷酸脫氫酶(G6PDH)負(fù)責(zé)催化NADPH合成,與能量的平衡、生長(zhǎng)速率和細(xì)胞活力等密切相關(guān)。此外,6PGDH逆境生理中具有重要作用。
測(cè)定原理
在底物6-磷酸葡萄糖酸存在下,6PGDH能催化NADP**NADPH,通過(guò)測(cè)定NADPH的**量即可計(jì)算出6PGDH活性。
實(shí)驗(yàn)中所需儀器及設(shè)備
紫外分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、1ml石英比色皿、雙蒸水
儀器:
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動(dòng)生化分析儀(比色測(cè)定波長(zhǎng)為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺(tái)式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
生化法檢測(cè)試劑盒:分光光度法、微量法、比色法、酶標(biāo)法、高液相色譜法,自主**,技術(shù)**團(tuán)隊(duì),操作簡(jiǎn)便快捷,規(guī)格合理、系列成套,價(jià)格合理,是廣大科研工作者的好選擇。
產(chǎn)品名稱(chēng) |
測(cè)定方法 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
6磷酸葡萄糖酸脫氫酶(6PGDH)生化試劑盒50管/48樣 |
紫外分光光度法 |
50管/48樣 |
BJ-0161122-50管/48樣 |
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見(jiàn)區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn)。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致公認(rèn)是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿(mǎn)意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來(lái)說(shuō),其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)允瓜♂尯蟮臉悠贩显噭┖械臋z測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
Cambinol SIRT1和SIRT1抑制劑(Cambinol) 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
SJ-172550 MDMX小分子抑制劑(SJ-172550) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
MHY1485 mTOR激活劑(自噬抑制劑) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
細(xì)胞膜染色試劑盒(紅色熒光)-M02 1000T|5000T
PAC-1 procaspase-3激活劑(PAC-1) 1mL(10mM)|10mg|50mg
ACY-1215 HDAC6抑制劑(ACY-1215) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
Everolimus Everolimus靶向試劑 5mg|10mg|50mg|100mg
Alrestatin 醛糖還原酶抑制劑(Alrestatin) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
MK-8245 SCD抑制劑(MK-8245) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
SA緩沖液(5×,pH7.4) 100ml|500ml
MD2-IN-1 MD2抑制劑(MD2-IN-1) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
Immunol Fluorence Staining Kit with AMCA-Labeled Goat Anti-Rabbit IgG AMCA抗兔**熒光染色試劑盒 >300次
Refametinib MEK抑制劑(Refametinib) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
AZD1208 PIM抑制劑(AZD1208) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
6磷酸葡萄糖酸脫氫酶(6PGDH)生化試劑盒50管/48樣小鼠丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 lovo, 結(jié)腸癌細(xì)胞 Human
植物脯氨酸(proline)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 Hep-2, 喉癌細(xì)胞系 Human
大鼠粒細(xì)胞集落激因子(G-CSF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 HL-60, 早幼粒白血病細(xì)胞 Human
犬骨橋素(OPN)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 MG-63, 骨肉瘤細(xì)胞 Human
人骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 RBE, 肝膽管癌細(xì)胞 Human
人小球足細(xì)胞裂隙膜蛋白(Podocin) ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 KM3, 多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞 Human
兔子**球蛋白A(IgA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 PANC-1, 胰腺癌細(xì)胞 Human
小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 Hep G2, 肝癌細(xì)胞系 Human
大鼠促甲狀腺**(TSH)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 GH3, 大鼠垂體生長(zhǎng)**腺瘤 Rattus
人腸三葉因子(ITF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 SGC-7901, 胃腺癌細(xì)胞系 Human
花生凝集素(PNA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 QBC-939, 膽管癌細(xì)胞 Human
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