操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
生化法檢測(cè)試劑盒:分光光度法、微量法、比色法、酶標(biāo)法、高液相色譜法,自主**,技術(shù)**團(tuán)隊(duì),操作簡(jiǎn)便快捷,規(guī)格合理、系列成套,價(jià)格合理,是廣大科研工作者的好選擇。
產(chǎn)品名稱
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測(cè)定方法
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規(guī)格
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貨號(hào)
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6磷酸葡萄糖脫氫酶(G6PDH)/葡萄糖6磷酸脫氫酶生化試劑盒50管/48樣
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紫外分光光度法
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50管/48樣
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BJ-0161118-50管/48樣
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商品介紹:
測(cè)定意義
G6PDH(EC 1.1.1.49)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是磷酸戊糖途徑的關(guān)鍵酶,催化 6-磷酸葡萄糖氧化為 6 -磷酸葡萄糖酸內(nèi)酯,同時(shí)將NADP+還原為NADPH,供生物合成及維持細(xì)胞內(nèi)的還原狀態(tài)用。因此6-磷酸葡萄糖脫氫酶活性的高低可以從一定程度上反映出生物體的生物合成和抗氧化能力。
測(cè)定原理
G6PDH催化NADP+還原**NADPH,在340 nm下測(cè)定NADPH增加速率。
需自備的儀器和用品
紫外分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
儀器:
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動(dòng)生化分析儀(比色測(cè)定波長(zhǎng)為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺(tái)式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致公認(rèn)是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來說,其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速
NS-018 JAK2抑制劑(NS-018) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
甲基紅試劑 10ml|50ml
Astragaloside IV ERK1/2和JNK抑制劑(Astragaloside IV) 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
alpha-Mangostin IDH1-R132H抑制劑(alpha-Mangostin) 1mL(10mM)|10mg|25mg|50mg|100mg
Dacie氏液 100ml
Purmorphamine Smoothened激活劑 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
GSK-7975A CRAC通道抑制劑(GSK-7975A) 1mL(10mM)|5mg|10mg
快速組織固定液 500ml
IDO-IN-2 IDO抑制劑(IDO-IN-2) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
Mefenamic acid 環(huán)氧化酶抑制劑(Mefenamic acid) 1mL(10mM)|5g|10g
Immunol Fluorence Staining Kit with Cy3-Labeled Goat Anti-Rat IgG Cy3抗大鼠**熒光染色試劑盒 >300次
總鐵結(jié)合力(TIBC)檢測(cè)試劑盒(亞鐵嗪微板法) 100T
地衣紅染色液(1%) 50ml
OTSSP167 hydrochloride MELK抑制劑 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
6磷酸葡萄糖脫氫酶(G6PDH)/葡萄糖6磷酸脫氫酶生化試劑盒50管/48樣人骨保護(hù)素(OPG)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 Antibody-HRP DiluentHRP/標(biāo)記抗體稀釋液(紅色)20ml國產(chǎn)gersion
人全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 Antibody-Biotin DiluentBiotin/標(biāo)記抗體稀釋液(黃色)20ml國產(chǎn)gersion
兔白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 Ammonium Persulfate(APS)20g國產(chǎn)gersion
小鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 AllIP/Co-IP Kit(Rabbit/Human/Rat/Mouse)通用型**沉淀試劑盒(兔/人/大鼠/小鼠)50次50次gersion
豬乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 AllIP/Co-IP Kit(Rabbit/Human/Rat)通用型**沉淀試劑盒(兔/人/大鼠)50次試劑盒gersion
大鼠維生素A(VA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 AEC Kit/AEC底物顯色試劑盒20ml國產(chǎn)gersion
人8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 A875/黑色素瘤細(xì)胞株國產(chǎn)gersion
人活化素A(Activin-A)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 A549全細(xì)胞裂解液100μg100μggersion
人神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(NT-3)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 A549/人肺癌細(xì)胞株國產(chǎn)gersion
小鼠腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 293T全細(xì)胞裂解液100μg100μggersion
兔主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/RLAⅠ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 30%丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺溶液(29:1)200ml國產(chǎn)gersion
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