操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測定過氧化氫的實(shí)際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準(zhǔn)備樣品:
a,細(xì)胞或組織樣品:取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進(jìn)行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細(xì)胞裂解液,如果有必要需進(jìn)行適當(dāng)勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測定,尿液通常也可以直接用于測定,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi),顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進(jìn)行CAT檢測。
d,血液中的紅細(xì)胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預(yù)冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計(jì)算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)的CAT含量。
3、 CAT檢測:按照下表設(shè)置空白管、自身對照管、測定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測定。樣品的檢測能設(shè)置平行孔。
4、分光光度計(jì)檢測405nm處吸光度,分光光度計(jì)比色杯光徑0.5cm。如果沒有分光光度計(jì),亦可用酶標(biāo)儀檢測,但如果有條件,盡量采用分光光度計(jì)檢測。蒸餾水調(diào)零,讀取各管吸光度值。一般應(yīng)數(shù)小時(shí)內(nèi)檢測完畢。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細(xì)閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱:纖維素酶(CL)測試盒
規(guī)格:50T/24樣
測試方法:比色法
客戶自備儀器和試劑:
紫外分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點(diǎn):
1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案,1小時(shí)即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
同源盒蛋白D13抗體英文名稱:HOXD13 0.2ml 二氫嘧啶脫氫酶(DPYD)ELISA試劑盒 DPYD ELISA Kit
組蛋白去甲基轉(zhuǎn)移酶JMJD1B抗體英文名稱:JMJD1B 0.1ml Pannexin3蛋白(PANX3)ELISA試劑盒 PANX3 ELISA Kit
有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激酶1抗體英文名稱:MSK1 0.2ml
Tafazzin蛋白抗體英文名稱:Tafazzin 0.1ml
戊型肝炎病毒(抗原)HEV 0.5mg
血管內(nèi)皮生長因子A抗原VEGF-A(Vascuoar endothelial growth factor A) 0.5mg
人絨毛膜促性腺 (夾心法一/二步法)Beta-HCG 96T
大鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白Hpt/HP ELISA Kit 96T
上調(diào)基因4抗體(C端)英文名稱:URG4 (C terminal) 0.2ml
心肌肌鈣蛋白抗體英文名稱:cardiac Troponin I 0.1ml 血型糖蛋白B(GYPB)ELISA試劑盒 GYPB ELISA Kit
磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體英文名稱:phospho-ERK1 (Thr202/Tyr204) + ERK2 (Thr183/Tyr185) 0.1ml 視網(wǎng)膜鈣黏附蛋白(RCAD)ELISA試劑盒 RCAD ELISA Kit
珠蛋白轉(zhuǎn)錄因子1抗體英文名稱:GATA-1 0.1ml 腱調(diào)蛋白(TNMD)ELISA試劑盒 TNMD ELISA Kit
組蛋白H2AX抗體英文名稱:Histone H2A.x 0.2ml 分揀連接蛋白2(SNX2)ELISA試劑盒 SNX2 ELISA Kit
C型凝集素受體CLEC13A抗體英文名稱:DCL-1 0.1ml 突觸融合蛋白7(STX7)ELISA試劑盒 STX7 ELISA Kit
軟骨基質(zhì)蛋白抗體英文名稱:Matrilin 1 0.2ml
去甲腎上腺素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白/神經(jīng)遞質(zhì)去甲腎上腺素轉(zhuǎn)運(yùn)體抗體英文名稱:NET1 0.2ml
纖維素酶(CL)測試盒萊菔素 592-95-0 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
苦味素 76-78-8 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
糠酸 88-14-2 HPLC≥98%;5mg 訂購|咨詢
卡維丁 32728-75-9 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
卡巴他賽 183133-96-2 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
咖啡醇 469-83-0 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
絹毛欖仁苷 55306-04-2 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
聚谷氨酸紫杉醇 263351-82-2 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
九里香酮 19668-69-0 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
焦性沒食子酸 87-66-1 HPLC≥98%;5mg 訂購|咨詢
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