腺病毒載體AVV應(yīng)用優(yōu)勢
腺病毒載體AVV是無包膜的線性雙鏈DNA病毒,在自然界分布廣大,至少存在100種以上的血清型。其基因組長約36kb,兩端各有一個(gè)反向末端重復(fù)區(qū)(ITR),ITR內(nèi)側(cè)為病毒包裝信號(hào)?;蚪M上分布著4個(gè)早期轉(zhuǎn)錄元(E1、E2、E3、E4)承擔(dān)調(diào)節(jié)功能,以及一個(gè)晚期轉(zhuǎn)錄元負(fù)責(zé)結(jié)構(gòu)蛋白的編碼。早期基因E2產(chǎn)物是晚期基因表達(dá)的反式因子和復(fù)制因子,早期基因E1A、E1B產(chǎn)物還為E2等早期基因表達(dá)所。因此,E1區(qū)的缺失可造成病毒在復(fù)制階段的流產(chǎn)。E3為復(fù)制非區(qū),其缺失則可以大大地?cái)U(kuò)大插入容量。腺病毒載體大多以5型(Ad5)、2型(Ad2)為基礎(chǔ),新增了55型(Ad55),很多研究機(jī)構(gòu)在研究當(dāng)中,55型將比5型流行以及使用更具廣大性。
使用優(yōu)勢:腺病毒載體轉(zhuǎn)基因效率高,體外實(shí)驗(yàn)通常接近的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率;可轉(zhuǎn)導(dǎo)不同類型的人組織細(xì)胞,不受靶細(xì)胞是否為分裂細(xì)胞所限;容易制得高滴度病毒載體,在細(xì)胞培養(yǎng)物中重組病毒滴度可達(dá)(10E+11)/ml;進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)并不整合到宿主細(xì)胞基因組,僅瞬間表達(dá),**性高。因而,腺病毒載體在基因**臨床試驗(yàn)方面有了越來越多的使用,成為繼逆轉(zhuǎn)錄病毒載體之后廣大使用且具前景的病毒載體。
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