人胃癌裸鼠模型方法:收集培養(yǎng)的BGC-823細(xì)胞在細(xì)胞培養(yǎng)至對數(shù)期時(shí),用RPMI-1640培養(yǎng)液中,制成約2*10 7個(gè)/ml細(xì)胞懸液,取0.2ml注入裸小鼠頸部皮下或背部皮下,每組接種三只鼠,當(dāng)皮下移植瘤長至直徑為1cm左右時(shí)取出腫瘤,及時(shí)放入含無血清培養(yǎng)液的平皿中,再修剪腫瘤組織,去除脂肪,結(jié)締組織及壞死腫瘤組織,并用無血清培養(yǎng)液洗滌2次,將瘤組織切成約1mm x1mm x2mm的小塊,加入適量的pbs備用。以Pentobarbital經(jīng)腹腔注射麻醉裸鼠,常規(guī)背部肩胛區(qū),用無菌套管針抽吸準(zhǔn)備好的2立方毫米大小瘤塊,將其接種于裸鼠背部肩胛區(qū)皮下,建立裸鼠皮下移植的人體胃癌裸鼠模型。
人胃癌裸鼠模型特點(diǎn):胃癌細(xì)胞接種后第三天即可見到裸鼠接種處皮下出現(xiàn)結(jié)節(jié),直徑約1.5mm,質(zhì)地較硬,在以后的幾天中,上述皮下結(jié)節(jié)沒有繼續(xù)增大,此階段為腫瘤細(xì)胞生長的潛伏期。隨后,裸鼠皮下的腫瘤結(jié)節(jié)開始緩慢生長,體積逐漸增大。
注意:如每次需要接種的數(shù)量太多時(shí),可用瘤細(xì)胞懸液接種。停止給予受試物之次日處死動物,先稱體重,后解剖皮下瘤塊,稱重。如對照組小白鼠腫瘤平均重量小于1g或20%鼠的瘤重小于400mg,大白鼠腫瘤平均重量小于2g,表示人胃癌裸鼠模型腫瘤生長不佳。在實(shí)驗(yàn)期給受試物組鼠死亡超過20%,或平均體重下降超過15%者,表示受試物的毒性反應(yīng)。