細(xì)胞凋亡流式檢測法:經(jīng)熒光染料標(biāo)記過的細(xì)胞樣品要求制成單細(xì)胞懸液,以一定的流速經(jīng)過噴嘴,流速的選擇與檢測的目的有關(guān),當(dāng)液體剛好進(jìn)入光源發(fā)出的激光形成的聚焦區(qū),此時(shí),標(biāo)記的熒光染料在激發(fā)光的激發(fā)下發(fā)射出特異顏色的熒光信號和散射光信號。信號經(jīng)過光電倍增管和光電探測器接收后轉(zhuǎn)化成電脈沖,送入計(jì)算機(jī)處理,應(yīng)用分析軟件可分析樣品的各種參數(shù),以直方圖或三維圖的形式顯示出來。
細(xì)胞凋亡流式檢測特點(diǎn):此方法是判斷細(xì)胞有無凋亡發(fā)生的簡便方法,且費(fèi)用低廉。凋亡的定量分析主要依靠流式細(xì)胞術(shù),是檢測細(xì)胞凋亡的有力工具,具有分析準(zhǔn)確、重復(fù)性好、費(fèi)用低廉、分析速度缺點(diǎn)是特異性較差、不易定性、靈敏性較差
方法比較:TUNEL檢測法也是細(xì)胞凋亡的常用檢測方法,是極為敏感、特異的方法,可量化凋亡細(xì)胞,動態(tài)觀察凋亡細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的變化以及與細(xì)胞表型同時(shí)分析。取材制成石蠟切片、冰凍切片或者細(xì)胞懸液等,繼而根據(jù)試劑盒說明操作。其局限性為只能標(biāo)記中期及晚期凋亡細(xì)胞,不能檢測只發(fā)生DNA大片段斷裂的凋亡細(xì)胞,也不能檢測斷裂末端的準(zhǔn)確數(shù)量。