熒光分光光度計(jì)的結(jié)構(gòu)有哪些特點(diǎn)
熒光分光光度計(jì)與紫外分光光度計(jì)屬一類產(chǎn)品,結(jié)構(gòu)均由激發(fā)光源、單色器、樣品室、光電倍 增管和讀出(記錄)裝置所組成。但是它們光源是不同的,熒光分光光度計(jì)多采用高壓汞燈、氙燈和激光光源。同時(shí),熒光測(cè)量多采用激發(fā)光和發(fā)射光成直角的光路,儀器組件的布置有所不同。 (1)激發(fā)光源:要比吸收法中光源強(qiáng)度大。 汞燈:發(fā)射強(qiáng)度大、穩(wěn)定,不需復(fù)雜電源,但譜線不連續(xù),數(shù)目少,主要用于濾片熒光計(jì)。 碘鎢燈:提供連續(xù)光譜300~700mn。 氙燈:發(fā)出射線的強(qiáng)度大,譜線連續(xù),分布于200~700 nm光域內(nèi),且在300~400nm 波段內(nèi) 射線強(qiáng)度幾乎相等,但該燈的電源功率要求大,且電源穩(wěn)定,因此電源結(jié)構(gòu)復(fù)雜。 激光:發(fā)光強(qiáng)度大,能極大地提高熒光分析的靈敏度。 (2)樣品池:通常由石英池(液體樣品用)或固體樣品架(粉末或片狀樣品)組成。測(cè)量液體時(shí),光源與檢測(cè)器成直角安排;測(cè)量固體時(shí),光源與檢測(cè)器成銳角安排。低溫?zé)晒鉁y(cè)定時(shí)在一樣品池外套一個(gè)液氮的透明石英真空瓶。 (3)單色器:熒光分光計(jì)通常具有兩個(gè)濾光片:濾光片在光源與樣品池之間,濾去不需要的光,讓需要的激發(fā)光通過。**濾光片在樣品池與檢測(cè)器之間,濾去溶劑散射 光、容器表面散射光、雜質(zhì)發(fā)出的光等,讓待測(cè)物質(zhì)發(fā)射的熒光通過。 熒光分光光度計(jì)通常具有兩個(gè)光柵,位置同濾光片,單色性好。 (4)檢測(cè)器:因熒光通常較弱,采用光電倍增管作檢測(cè)器,靈敏度高。選擇光電倍增管要考慮:響應(yīng)波長(zhǎng)、靈敏度和嗓聲水平。 藍(lán)敏管對(duì)蛋白質(zhì)、核酸的測(cè)量適用,而紅敏管則適用于熒光染料檢測(cè)。 (5)顯示系統(tǒng):光度表、計(jì)算機(jī)操作系統(tǒng)等。
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