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怎樣優(yōu)化手性分離色譜柱


環(huán)糊精色譜柱在分離多種手性化合物方面具有獨(dú)特性。在我的上一篇博客中,我討論了各種手性化合物的單獨(dú)色譜柱分離。今天,我想展示如何優(yōu)化這種分離。線速度和升溫速率的變化會極大地影響對映異構(gòu)體的分離度。根據(jù)手性色譜柱的類型,初始 GC 柱箱溫度會影響峰寬。色譜柱樣品容量因化合物不同而異,過載會導(dǎo)致拖尾峰變寬并降低對映體分離。

線速度(柱流)

在我們的分析中,我們使用了氫氣。氫氣的*佳線速度約為 40 cm/s。然而,如圖 1 所示,更高的流量/線速度 (60-80 cm/s) 可獲得更好的分辨率。

手性分離的優(yōu)化


圖 1:作為線速度函數(shù)的分辨率因子。Rt-βDEXsa:40°C(內(nèi)酯為 80°C)至 200°C @ 2°C/min。(保持 1 分鐘)。氫氣載氣。

溫度程序

手性分辨率可以隨著溫度斜坡速度的降低而提高。*佳溫度程序?yàn)?1-2 °C/min(圖 2)。

手性分離的優(yōu)化


圖 2:作為溫度斜坡函數(shù)的分辨率因子。Rt-βDEXsa:40°C 至 200°C(保持 1 分鐘)。線速度 80 厘米/秒。氫氣載氣

為了獲得*佳手性分離,請使用:

  • 使用氫氣載氣時的線速度更快(60-80 cm/sec.)。
  • 較慢的升溫速率 (1-2°C/min.)。
  • 適當(dāng)?shù)?低工作溫度(40 或 60°C)。
  • 柱上濃度為 50ng 或更少。

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