固相萃取(Solid Phase Extraction,簡稱SPE)是從八十年代中期開始發(fā)展起來的一項(xiàng)樣品前處理技術(shù)。由液固萃取和液相色譜技術(shù)相結(jié)合發(fā)展而來。主要用于樣品的分離，純化和富集。主要目的在于降低樣品基質(zhì)干擾，提高檢測靈敏度。

SPE技術(shù)基于液-固相色譜理論，采用選擇性吸附、選擇性洗脫的方式對樣品進(jìn)行富集、分離、凈化，是一種包括液相和固相的物理萃取過程;也可以將其近似地看作一種簡單的色譜過程。

SPE是利用選擇性吸附與選擇性洗脫的液相色譜法分離原理。較常用的方法是使液體樣品溶液通過吸附劑，保留其中被測物質(zhì)，再選用適當(dāng)強(qiáng)度溶劑沖去雜質(zhì)，然后用少量溶劑迅速洗脫被測物質(zhì)，從而達(dá)到快速分離凈化與濃縮的目的。也可選擇性吸附干擾雜質(zhì)，而讓被測物質(zhì)流出;或同時(shí)吸附雜質(zhì)和被測物質(zhì)，再使用合適的溶劑選擇性洗脫被測物質(zhì)。

固相萃取法的萃取劑是固體，其工作原理基于:水樣中欲測組分與共存干擾組分在固相萃取劑上作用力強(qiáng)弱不同，使它們彼此分離。固相萃取劑是含C18或C8、腈基、氨基等基團(tuán)的特殊填料。

針對填料保留機(jī)理的不同(填料保留目標(biāo)化合物或保留雜質(zhì))，操作稍有不同。

固相萃取操作一般有四步(見圖1):

1.填料保留目標(biāo)化合物

l活化----除去小柱內(nèi)的雜質(zhì)并創(chuàng)造一定的溶劑環(huán)境。

l上樣----將樣品用一定的溶劑溶解，轉(zhuǎn)移入柱并使組分保留在柱上。

l淋洗----*大程度除去干擾物。

l洗脫----用小體積的溶劑將被測物質(zhì)洗脫下來并收集。

2.填料保留雜質(zhì)

固相萃取操作一般有三步(見圖2):

l活化--除去柱子內(nèi)的雜質(zhì)并創(chuàng)造一定的溶劑環(huán)境。

l上樣--將樣品轉(zhuǎn)移入柱，此時(shí)大部分目標(biāo)化合物會隨樣品基液流出，雜質(zhì)被保留在柱上，

l故此步驟要開始收集

l洗脫---用小體積的溶劑將組分淋洗下來并收集，合并收集液。

此種情況多用于食品或農(nóng)殘分析中去除色素。

相對于傳統(tǒng)的液液萃取法和蛋白沉淀法，固相萃取具有無可比擬的優(yōu)勢，具體如下:

凈化方法: LLE(液液萃取)

優(yōu)點(diǎn): 無需特殊裝置

缺點(diǎn):

1.操作繁瑣，費(fèi)時(shí)

2.需要耗費(fèi)大量的有機(jī)溶劑，導(dǎo)致高成本和對環(huán)境的污染

3.難以從水中提取高水溶性物質(zhì)

凈化方法:PPT(蛋白沉淀)

優(yōu)點(diǎn): 操作簡單，無需特殊裝置

缺點(diǎn):

1.非特異性的沉淀反應(yīng)可能使微量的分析物隨著基質(zhì)蛋白質(zhì)共同沉淀而損失。

2.凈化效果較弱，檢測靈敏度和可靠性低。

SPE(固相萃取)

優(yōu)點(diǎn):

1可同時(shí)完成樣品富集與凈化，大大提高檢測靈敏度

2比液液萃取更快，更節(jié)省溶劑, 可自動化批量處理

3重現(xiàn)性好

缺點(diǎn):

1.使用進(jìn)口固相萃取小柱成本較高

2.需要專業(yè)人員協(xié)助進(jìn)行方法開發(fā)

1.一個(gè)樣品包括分離物和干擾物通過吸附劑;

2.吸附劑選擇性的保留分離物和一些干擾物，其他干擾物通過吸附劑;

3.用適當(dāng)?shù)娜軇┝芟次絼瓜惹氨Ａ舻母蓴_物選擇性的淋洗掉，分離物保留在吸附劑床上;

4.純化、濃縮的分離物從吸附劑上淋洗下來。