近幾年光遺傳學(xué)在電生理領(lǐng)域非?;馃?,在不了解它之前相信很多人會(huì)覺得很**,很難懂。在我們了解之后會(huì)發(fā)現(xiàn)其實(shí)它很簡(jiǎn)單,只是一種工具的應(yīng)用:
通過基因工程,科學(xué)家構(gòu)建出了攜帶有特定種類視蛋白基因的病毒載體,用它們感染培育好的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,再通過各種操作將視蛋白特異性表達(dá)在某一類神經(jīng)細(xì)胞上。這樣一來,一類新的轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)動(dòng)物誕生了,它們腦內(nèi)將有且僅有這一類神經(jīng)細(xì)胞對(duì)光敏感。
視蛋白是一種對(duì)光敏感的獨(dú)特蛋白,也就是附著于細(xì)胞膜上的光敏感離子通道,在受光刺激后打開并向細(xì)??內(nèi)運(yùn)送特定的某種離子,這樣一來就可以通過光刺激的手段實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞的電活動(dòng)加以控制。
*簡(jiǎn)單的例子,人的眼睛的視網(wǎng)膜上就長(zhǎng)滿了視紫紅質(zhì)(一種視蛋白)的視錐細(xì)胞和視桿細(xì)胞,它們接收到大自然界的光刺激后,將光線轉(zhuǎn)化為電信號(hào)送到大腦,我們才看到了五彩繽紛的顏色。
東樂自然基因所代理的美國(guó)ALA公司光刺激器正是這樣一款給予光刺激的系統(tǒng):
從光遺傳學(xué)發(fā)展以來,給光刺激的儀器就開始陸續(xù)發(fā)展。*早美國(guó)斯坦福大學(xué)所做的光遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)就是通過SUTTER公司的DG-4光源來給光刺激,直接通過顯微鏡的物鏡給光刺激。
到今天,這種方法仍然是給光刺激的手段之一,它的優(yōu)點(diǎn)是通過光柵光源+物鏡可以給出想要的任何波段的光,且光斑大小可以通過聚焦的方式調(diào)節(jié)。而目前通過物鏡給光也可以直接先確定好需要哪種波段的光,購(gòu)置一套Cool LED的光源加載在顯微鏡上,這樣的方式在性價(jià)比就顯得非常高了。
上述的這種采用冷光源結(jié)合顯微鏡物鏡給光的方式已經(jīng)見于很多實(shí)驗(yàn)室。作為光刺激,確實(shí)是比較好的方式方法。圖中的這種Cool LED光源是英國(guó)Scientifica公司的產(chǎn)品。目前也有其他公司的類似產(chǎn)品,也有國(guó)產(chǎn)的類似產(chǎn)品。其原理簡(jiǎn)單,價(jià)格相對(duì)也不貴。
下面詳細(xì)介紹一下東樂自然基因公司所代理的ALA公司的光刺激器。下圖為光刺激的主機(jī)部分:光源。
在LIGHT OUTPUT 下面是一個(gè) light guide ,這是一個(gè)光纖接口,通過它來連接光纖。
光源內(nèi)部可以裝置三種顏色的燈泡,465nm Blue LED 520nm Green LED 624nm Amber LED。
需要注意的是:此光源內(nèi)只能安裝一種顏色的燈泡,比如已經(jīng)安裝了 藍(lán)光的燈泡,如果需要使用其他兩種顏色的光的時(shí)候,需要拆卸這個(gè)光源的盒子,更換其他顏色的燈泡。而這個(gè)工作是非常簡(jiǎn)單的。
光纖的另外一端連接到Axon 探頭上安裝的這個(gè)很特別的holder上。
下面來介紹下這個(gè)特殊的holder:
我們?cè)谀てQ實(shí)驗(yàn)中用到的holder,也就是Axon公司的holder,型號(hào): 1-HL-U 。它是一個(gè)直的,沒有分支的holder,相信大家都應(yīng)該見過。而這種特殊的holder是專門為了光刺激實(shí)驗(yàn)所涉及。多出一個(gè)支路,是專門提供給光纖使用的。
該holder前面細(xì)長(zhǎng)的光纖是holder本身自帶的。在使用時(shí)只需將holder安裝在探頭上,然后將黑色的光纖插入到holder的分支處即可。
此部分可以看到藍(lán)色光纖的前面有一小段銀色部分。這個(gè)就是銀絲(記錄電極)。
這個(gè)特點(diǎn)目前其他廠家的光刺激器(含國(guó)產(chǎn))都沒有!而核心之處也就是這個(gè)特別的holder!光刺激器與電生理實(shí)驗(yàn),特別是腦片膜片鉗實(shí)驗(yàn)息息相關(guān)。東樂自然基因生命科學(xué)公司在電生理領(lǐng)域經(jīng)營(yíng)多年,在國(guó)內(nèi)擁有廣泛的用戶群體!歡迎廣大實(shí)驗(yàn)室工作人員及經(jīng)銷商來電咨詢!電話:.
東樂自然基因華中區(qū)銷售部 吳正文供稿