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{ 顯微鏡載物臺振動問題 }
在組織切片中膜片鉗制細(xì)胞時,在實驗過程中能夠看到樣品的不同部分非常重要。這是找到要修補(bǔ)的細(xì)胞、重新定位刺激電極或**應(yīng)用移液器以及對正在記錄的細(xì)胞的遠(yuǎn)端部分進(jìn)行成像所必需的。這種移動可以通過在保持樣品固定的同時移動顯微鏡來實現(xiàn),也可以通過移動樣品同時保持顯微鏡固定來實現(xiàn)。
從歷史上看,保持樣品固定并移動顯微鏡是很常見的。這是由于“針對切片電生理學(xué)優(yōu)化”的顯微鏡中樣品臺的移動通常遠(yuǎn)非平穩(wěn),并且有振動的趨勢。這種振動會導(dǎo)致現(xiàn)有的 高阻封接破裂并丟失記錄。因此,過去通常為膜片鉗裝置選擇**個選項(移動顯微鏡、固定樣品)。這確實是避免載物臺振動的好方法,只要顯微鏡保持簡單輕便即可。
隨著顯微鏡的成像功能增加,移動顯微鏡變得越來越復(fù)雜。連接的相機(jī)、光源、液體光導(dǎo)等需要隨顯微鏡移動,這可能會影響成像系統(tǒng)的性能。而且,移動重型顯微鏡往往會引起整個減振臺的振動,包括固定的樣品臺。因此,顯微鏡固定且樣品移動的膜片鉗系統(tǒng)變得越來越普遍。為了確保與機(jī)械手一起移動樣本不會干擾記錄,平臺移動平穩(wěn)且無振動變得越來越重要。這種穩(wěn)定的載物臺是高效可靠的膜片鉗裝置的核心組成部分,將對實驗的成功率產(chǎn)生重大影響。
{ 是什么讓平臺移動順暢? }
使用校準(zhǔn)的 3D 加速度計測量的 Sensapex uMs-MXY 平臺(藍(lán)色)和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)參考產(chǎn)品(紅色)測量的 5 mm/s 移動(黑色)的垂直振動比較。
防止載物臺移動過程中的振動從載物臺的中心開始: 運動生成本身必須平穩(wěn)。電機(jī)、流道和軸承必須按照非常高的標(biāo)準(zhǔn)制造并適當(dāng)張緊。甚至平臺的驅(qū)動信號也有所貢獻(xiàn)——平穩(wěn)的加速和減速(而不是猛烈運動和猛烈停止)是關(guān)鍵。歸根結(jié)底,如果不完全描述平臺特征,這些方面幾乎是不可能判斷的。也就是說,大多數(shù)(如果不是全部)顯微鏡載物臺制造商可能會認(rèn)真完成這部分設(shè)計。
但是,即使載物臺的核心運動是*佳的,振動仍然是可能的。這歸結(jié)為基本物理學(xué):膜片鉗平臺是一個倒擺:牢固地固定在光學(xué)平臺上,頂板由相對較長的腿支撐,頂板上有相當(dāng)大的重量。任何加速和減速都會導(dǎo)致該鐘擺出現(xiàn)一些 “搖擺”(即振動)。擺錘還將拾取并可能增強(qiáng)電機(jī)線性運動產(chǎn)生的剩余振動。雖然這無法完全避免,但可以簡化為完全可以忽略不計,并且對錄制或成像沒有影響。
{ 使載物臺不易振動}
減少樣品臺在移動過程中的振動趨勢建立在基本物理概念的基礎(chǔ)上。首先要考慮的是,整個物臺組件越硬,尤其是頂板和固定頂板的柱子或腿,物臺頂部在移動過程中就越不容易受到振動。堅固的設(shè)計是關(guān)鍵。
將 uMs FXY 載物臺頂板的剛度與鐵軌進(jìn)行比較。請注意不同的顏色縮放。
**點同樣明顯:質(zhì)心越低越好。因此,將所有沉重的核心部件,尤其是電機(jī)和導(dǎo)軌,保持在盡可能低的位置將是一個主要因素。這是物臺設(shè)計中常見的妥協(xié)點。電機(jī)通常位于靠近頂板的位置,不必要地將質(zhì)心向上移動。但是,平臺質(zhì)心的高度不僅僅由平臺本身決定。安裝在平臺上的設(shè)備也將有所貢獻(xiàn)。平臺上*重的物體將是顯微操縱器。理想情況下,這些應(yīng)該很輕(每個 >1 kg 就好了),但也不應(yīng)該不必要地高,以免進(jìn)一步提高質(zhì)心(距離載物臺表面小于 100 毫米是一個很好的目標(biāo)值)。
Time-domain”ring-down”comparision of uMs FXY VS.competitor
{ 總結(jié) }
切片膜片鉗實驗越**,在記錄過程中移動樣本就越有用。為了能夠在不危及實驗成功的情況下可靠地做到這一點,樣品臺的設(shè)計必須能夠平穩(wěn)移動,振動風(fēng)險很小。這是通過以下方式實現(xiàn)的:
1、線性運動部件的良好設(shè)計和制造;
2、確保載物臺,尤其是頂板安裝,盡可能堅硬;
3、保持載物臺的質(zhì)心較低;
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