根據(jù)前文介紹,初步拉制出一根玻璃電極后,就要根據(jù)其**形狀及具體要求進一步精細調整參數(shù)以滿足需求。
P1000調整的原理與P97相同,下圖再次貼出供參考。
用于顯微注射、胞內(nèi)記錄等的電極較為細長,通常會單步拉制,其PULL和VEL參數(shù)的值一般比較大,可以用上圖直接調整。而用于膜片鉗的電極相對比較短粗,一般選擇多步拉制,此時參數(shù)的調整方法#會略有不同。
主要介紹一下用于膜片鉗的電極拉制技巧。
這種電極一般會由3至5步進行拉制,步數(shù)越多,電極頸部越短,**也相對更粗,阻抗變小,需要根據(jù)具體情況來選擇。此時我們會用VEL這項參數(shù)來控制具體的拉制步數(shù),VEL通常會在20左右,根據(jù)鉑金片、拉制儀及玻璃管體質不同也會略有變化,而PULL在這里會選擇0。
以4步拉制進行舉例說明,Heat值通過Ramp測試進行確定,TIME(或DELAY)和PRESSURE暫按照CookBook中的推薦參數(shù)保持不變(詳見上篇儀器科普文章)。
假如VEL這次選擇了25,拉制完成后未操作設備時,可以在屏幕下方看到結果提示。其中**行表示該程序共循環(huán)了4次,**行表示這次的電極在程序的第1行結束,因為這個程序一共只寫了1行,所以這就代表本次拉制用了4步。
此時應該將VEL改為24,重新拉制,記錄步數(shù),并依次遞減,直到有一個VEL使其步數(shù)變?yōu)?,假設該VEL為22。然后VEL再從25依次遞增,直到有一個VEL使步數(shù)變?yōu)?,假設為26。那么能使該電極拉制步數(shù)為4的VEL分別有23、24、25,選擇中間那個值即可,如果得到的VEL只有兩個,則取較大那個值。
確定了VEL后,在程序中將4步分為4行分別設置出來,在P1000中,可以在Line這一項下面點擊“x1”,將其修改為“x3”,如下圖所示,表示這一行重復3次,然后在**行按照**行的參數(shù)抄上去,再根據(jù)上文表格中的調整方法對*后一行進行調整,*后一行的參數(shù)會直接影響電極**的形狀,而前面3行主要影響頸部形狀。在P97中,調整方法同理,只是P97需要將所有行全部寫出,無法單獨設置某行進行重復。
電極拉制參數(shù)的設置主要就是這些,更加詳細的內(nèi)容,比如各個參數(shù)的具體含義及更加**的影響等細節(jié)部分可以閱讀隨包裝附帶的說明書和Cookbook進行了解。
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