微生物生長繁殖的控制(一)溫度 1、高溫**(**)法——是*常用的物理方法。高溫可引起蛋白質(zhì)、核酸等活性大分子氧化或變性失活而導致微生物死亡。 ★干熱**法(dry heat sterilization) §焚燒法(incineration):是將被**物品在火焰中燃燒,使所有的生物質(zhì)碳化。簡單、徹底,但對被**物品的破壞極大。適用于無經(jīng)濟價值的物品**,及不怕燒的實驗器具,如接種環(huán)、鑷子、試管或三角瓶口的**等。 §干燥熱空氣**法(hot-air oven):將物品放入烘箱內(nèi),然后升溫至150℃—170 ℃ ,維持1—2小時。適用于玻璃、陶瓷和金屬物品的**,不適合液體樣品,及棉花、紙張、纖維和橡膠類物質(zhì)的**。 特點:由于空氣傳熱穿透力差,菌體在脫水狀態(tài)下不易殺死,所以溫度高、時間長。 ★濕熱法(moist heat sterilization) : 特點:溫度低、時間短、**效果高 原因: 1) 菌體內(nèi)含水量越高,則凝固溫度越低; 2) 蒸汽冷凝會放出潛熱; 3) 飽和水蒸汽穿透力強; 4) 濕熱易破壞細胞內(nèi)蛋白質(zhì)大分子的穩(wěn)定性,主要破壞氫鍵結(jié)構(gòu)。 高壓蒸汽**法 利用水的沸點隨水蒸氣壓力的增加而上升,以達到100 ℃以上高溫**的方法。 方法:121℃(1kg/cm2或15磅/英寸2)維持15-20min。 112℃(0.5kg/cm2或8磅/英寸2)20-30min。 115℃(0.75kg/cm2或11磅/英寸2)20-30min。 應根據(jù)**物品的性質(zhì)或成分選擇**溫度 例如:生理鹽水、營養(yǎng)瓊脂等培養(yǎng)基用121 ℃。 含葡萄糖、乳糖、氨基酸等培養(yǎng)基用112 ℃。 適用:耐高溫物品,玻璃儀器、含水或不含水的物品。 高溫對培養(yǎng)基的不利影響: ▲會產(chǎn)生混濁或形成不溶性沉淀 ▲營養(yǎng)成分被破壞( PO4-3存在,葡萄糖生成酮糖,菌不利用); ▲色澤加深(褐變?nèi)绠a(chǎn)生氨基糖等); ▲改變培養(yǎng)基的pH值(通常下降0.2) ; ▲形成有害物質(zhì),抑制微生物生長; 消除有害影響的措施 采用特殊的加熱**法 過濾**法 加入螯合劑 2、低溫抑菌低溫——低溫是通過降低酶反應速度使微生物生長受到抑制。 冷藏法:5℃,微生物斜面菌種放置冷藏箱中可保存數(shù)周至數(shù)月而不衰竭死亡;食品保鮮 冷凍法:食品工業(yè)中采用-10℃左右的冷凍溫度較長時間地保藏食品;冷凍法也可用作菌種保藏,但所需溫度更低,如-80℃低溫冰箱、或-78℃干冰、或-80℃液氮中冷凍保存。 (二)過濾**法采用濾孔比細菌還小的篩子或濾膜作成各種過濾器,當空氣或液體流經(jīng)篩子或濾膜時,微生物不能通過濾孔而被阻留在一側(cè),從而達到**的目的。但不能除去病毒。 實驗室中常用的濾器: 濾膜過濾器、蔡氏過濾器、玻璃過濾器、磁土過濾器等。 過濾介質(zhì):醋酸纖維素膜、硝酸纖維素膜、聚丙烯膜; 以及石棉板、燒結(jié)陶瓷、燒結(jié)玻璃等。 濾器孔徑:常用0.22 μm 、0.45 μm 。 應用:對于含酶、血清、維生素和氨基酸等熱敏物質(zhì)**。 (三)輻射 紫外線** 使用紫外燈照射,可以根據(jù)1W/M3來計算劑量,若以面積計算,一般30W的紫外燈可用于15M2的房間**,照射時間為20—30分鐘,有效照射距離為1米左右。 γ射線** Co60放射性元素可放出γ射線。 **劑量:20—50KGY