操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
生化法檢測(cè)試劑盒:分光光度法、微量法、比色法、酶標(biāo)法、高液相色譜法,自主**,技術(shù)**團(tuán)隊(duì),操作簡(jiǎn)便快捷,規(guī)格合理、系列成套,價(jià)格合理,是廣大科研工作者的好選擇。
產(chǎn)品名稱
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測(cè)定方法
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規(guī)格
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貨號(hào)
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內(nèi)切β1,4葡聚糖酶(Cx)生化試劑盒50管/24樣
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可見(jiàn)分光光度法
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50管/24樣
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BJ-01611260-50管/24樣
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商品介紹:
測(cè)定意義:
Cx存在于**、**和動(dòng)物體內(nèi),是纖維素酶系的組份之一,Cx主要作用于非晶態(tài)纖維素和水溶性纖維素衍生物,隨機(jī)水解糖苷鍵,將其分解成葡萄糖、纖維二糖、纖維三糖和其他寡聚體。
測(cè)定原理:
采用3,5-二硝基水楊酸法測(cè)定Cx催化羧甲基纖維素鈉降解產(chǎn)生的還原糖的含量。
需自備的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
儀器:
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動(dòng)生化分析儀(比色測(cè)定波長(zhǎng)為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺(tái)式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見(jiàn)區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn)。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致公認(rèn)是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來(lái)說(shuō),其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速
C5b 人補(bǔ)體片斷5bELISA檢測(cè)試劑盒 C5b ELISA Kit
C4b 人補(bǔ)體片斷4bELISA檢測(cè)試劑盒 C4b ELISA Kit
MAGE 人黑色素瘤相關(guān)抗原ELISA檢測(cè)試劑盒 MAGE ELISA Kit
TF 人轉(zhuǎn)移因子ELISA檢測(cè)試劑盒 TF ELISA Kit
FSP 人纖維母細(xì)胞表面抗原ELISA檢測(cè)試劑盒 FSP ELISA Kit
GM 人胃粘液素ELISA檢測(cè)試劑盒 GM ELISA Kit
VGCC 人鈣離子通道抗體ELISA檢測(cè)試劑盒 VGCC ELISA Kit
HAMA 人抗鼠抗體ELISA檢測(cè)試劑盒 HAMA ELISA Kit
sAC 人可溶性腺苷酸環(huán)化酶ELISA檢測(cè)試劑盒 sAC ELISA Kit
AC-1 人腺苷酸環(huán)化酶1ELISA檢測(cè)試劑盒 AC-1 ELISA Kit
內(nèi)切β1,4葡聚糖酶(Cx)生化試劑盒50管/24樣1瓶 NCI-H23細(xì)胞株 NCI-H23 低溫運(yùn)輸和保存
小肉湯 the Smallest Broth Medium 250g
5g 金精三羧酸 ATA(Aurintricarboxylic Acid) 室溫保存
1000mL Tris-Glycine-SDS Running Buffer,10X Tris-Glycine-SDS Running Buffer,10X 常溫保存
50μg 極高熱穩(wěn)定單鏈結(jié)合蛋白 ET SSB -20℃保存
2 ug pBAD/gIII B pBAD/gIII B 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
5g 蝸牛干粉 Snailase Powder 4℃保存
2 ug pEBFP-C1 pEBFP-C1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
CIN-1基礎(chǔ) Cepulodin Irgasan Novobiocin Agar 250g
1g 精胺 Spermine 4℃保存
50T 玉米35S/MS RT-PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
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