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產(chǎn)品資料

豬特定基因序列熒光定量PCR試劑

豬特定基因序列熒光定量PCR試劑
  • 如果您對該產(chǎn)品感興趣的話,可以
  • 產(chǎn)品名稱:豬特定基因序列熒光定量PCR試劑
  • 產(chǎn)品型號:BJ-01R4801
  • 產(chǎn)品展商:邦景
  • 產(chǎn)品文檔:無相關(guān)文檔
簡單介紹
豬特定基因序列熒光定量PCR試劑不需要分離病毒培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
產(chǎn)品描述

訂購信息:

產(chǎn)品名稱:豬特定基因序列熒光定量PCR試劑

英文名稱:詳見說明
貨號:BJ-01R4801

產(chǎn)品規(guī)格:50T

運(yùn)輸:低溫

保存:負(fù)20度

有效期:一年

貨期:現(xiàn)貨

【儲存條件及有效期】:

-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,有效期6個(gè)月。

【適用儀器】:

ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。

【樣本采集、存放及運(yùn)輸】:

u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;

u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(多凍融3次);

u 運(yùn)輸:采用**或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。

本公司產(chǎn)品僅用于科研。

【自備試劑】:

核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。

組成及試劑配制:

1、 酶標(biāo)板:一塊(96孔)

2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

5、 檢測稀釋液B:1×10ml。


使用方法:

一、樣品 RNA 的制備

1、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司生產(chǎn)的一管式病毒 RNAout

2、或柱式病毒 RNAout。

二:RT(逆轉(zhuǎn)錄)反應(yīng)合成 cDNA

1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系(20 μL 體系)

2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。

3. 嚴(yán)格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),

反應(yīng)終體積為 20μL。

4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應(yīng)。

5. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng),然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):

1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;

2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;

3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。

4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。

實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括量和相對定量)和定性分析。

主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。

主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。

CRT5  2μg  Androstenedione  25mg    

LYVE1 Human  25mg  JP 1302 dihydrochloride  5mg    

EIF4EBP1 Human  10mM(in1mLDMSO)  Oxytocin (acetate)  5mg    

JWH 073 2’-naphthyl-N-(1,1-dimethylethyl) isomer  10mg  Fiboflapon (GSK2190915)  100mg    

HGF Human, CHO   5g  Tpl2 Kinase Inhibitor  1mg    

MED4 Human  25mg  Hexaconazole ((-)-Hexaconazol)  100g    

IL 9 Human  50mg  RLN2 Human  5mg    

NTAL Human  5mg  Uridine-5’-diphosphoglucuronic Acid (sodium salt)  5μg    

PF-9184  100μg  7-keto Dehydroepiandrosterone  5mg    

Relaxin H2 (human)  5μg  Yangonin  1g    

RuBi-4AP  10mg  MPG, HIV related  1g    

Bepridil hydrochloride hydrate  1g  Tau Peptide (277-291)  1mg    

Tianeptine  5g  Z-Leu-Ala-OH  50mg    

H-His-Pro-NH??· 2 HBr  25g  Glyoxalase I inhibitor  50mg    

H-Sar-NH2.HCl  50mg  (D-Asp2??-Exenatide  250mg    

豬特定基因序列熒光定量PCR試劑L-MIMOSINE  L-Mimosine是一種非蛋白氨基酸,可作為鐵螯合劑。

Erdafitinib (Synonyms: JNJ-42756493)  Erdafitinib (JNJ-42756493)是有效的有口服活性的 FGFR 家族抑制劑;抑制FGFR1-4活性的 IC50 分別為1.2, 2.5, 3

Cetrorelix acetate  Cetrorelix Acetate is a potent gonadotropin-releasing hormone (GnRH) receptor an

Triptorelin  Triptorelin is a gonadotropin-releasing hormone agonist (GnRH agonist) used as t

dBET6  dBET6 是一種高效的,選擇性的,細(xì)胞透過的 BET 降解劑,IC50 值為 14 nM,具有抗腫瘤活性。

(+)-JQ1 PA  (+)-JQ1 PA 是溴結(jié)構(gòu)域和額外末端結(jié)構(gòu)域 (BET) 抑制劑 JQ1 的衍生物,其 IC50 值為 10.4 nM。

ly-900009  LY900009 is a small molecule inhibitor of Notch signalling via selective inhibit

ly411575  LY-411575 是高效的 γ-secretase 抑制劑,能夠抑制 Aβ40 蛋白的產(chǎn)生,其 IC50 值為 0.0

N,N-dimethyl-2-oxo-1,3-dihydroindole-5-sulfonamide  

N-(3-bromophenyl)-6-nitroquinazolin-4-amine  

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;

②堿基配對原則;

③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)。

(3) 簡便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。

(4) 對標(biāo)本的純度要求低

不需要分離病毒或及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

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