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產(chǎn)品資料

錦鯉皰疹病毒熒光-PCR法

錦鯉皰疹病毒熒光-PCR法
  • 如果您對該產(chǎn)品感興趣的話,可以
  • 產(chǎn)品名稱:錦鯉皰疹病毒熒光-PCR法
  • 產(chǎn)品型號:BJ-01R3795
  • 產(chǎn)品展商:邦景
  • 產(chǎn)品文檔:無相關文檔
簡單介紹
錦鯉皰疹病毒熒光-PCR法不需要分離病毒培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。
產(chǎn)品描述

PCR反應的特異性決定因素為:

①引物與模板DNA特異正確的結合;

②堿基配對原則;

③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在學中zui小檢出率為3個。

(3) 簡便、快速

PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。

(4) 對標本的純度要求低

不需要分離病毒或及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。

訂購信息:

產(chǎn)品名稱:錦鯉皰疹病毒熒光-PCR法

英文名稱:Koi Herpesvirus(KHV)PCR
貨號:BJ-01R3795

產(chǎn)品規(guī)格:50T

運輸:低溫

保存:負20度

有效期:一年

貨期:現(xiàn)貨

 

【儲存條件及有效期】:

-20℃避光保存,避免反復凍融,有效期6個月。

【適用儀器】:

ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。

【樣本采集、存放及運輸】:

u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;

u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(多凍融3次);

u 運輸:采用**或泡沫箱加冰密封進行運輸。

本公司產(chǎn)品僅用于科研。

【自備試劑】:

核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。

組成及試劑配制:

1、 酶標板:一塊(96孔)

2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

5、 檢測稀釋液B:1×10ml。


使用方法:

一、樣品 RNA 的制備

1、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司生產(chǎn)的一管式病毒 RNAout

2、或柱式病毒 RNAout。

二:RT(逆轉錄)反應合成 cDNA

1. 按下表配制 RT 反應體系(20 μL 體系)

2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。

3. 嚴格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),

反應終體積為 20μL。

4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應。

5. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。

實驗注意事項:

1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;

2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;

3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。

4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。

實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括量和相對定量)和定性分析。

主要服務:DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。

主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。

Phosphatidylinositols (soy) (sodium salt)  25mg  Sibiricaxanthone B  5mg  Fmoc-Asp-NH2  5g

CMV Mosaic  1μg  Boc-His(Boc)-OH  50mg  Y.Enterocolitica (O:9) YopE  10mM(in1mLDMSO)

Mal-PEG2-NH2  5mg  Chymostatin  1mg  iFSP1  1g

(±)7(8)-EpDPA  25g  Apelin-17 (human, bovine)  20μg  Xipamide  10mg

Boc-4-oxo-Pro-OH  5mg  Norovirus Group-2  1g  CUDC-907  25mg

13,14-dihydro-15-keto Prostaglandin A2  5mg  7,8,9,10-Tetrahydrobenzo[a]pyren-7-ol  10mM(in1mLDMSO)  MAO-IN-1  5mg

POBN  50mg  Cav 2.2 blocker 1  10mg  4-Methylumbelliferyl β-D-Galactopyranoside-6-sulfate (sodium salt)  100μg

Piperacillin Sodium  250mg  BI-3812  5mg  Isocytosine  2μg

Sulfaphenazole  50mg  SKF 38393 hydrobromide  5mg  (-)-Sparteine sulfate pentahydrate  10mM*1mLinDMSO

KRAS 2A Human  100μg  NNC 05-2090 hydrochloride  1g  NDUFS6 Human  1mg

Hydrastinine hydrochloride  20μg  Carbazole derivative 1 (2-Fluoro-7-[(3-pyridinyl)methyl]-9H-carbazole)  5mg  CM-579 trihydrochloride  10mg

4’,?7-?Di-?O-?methylnaringenin  5mg  Acenocoumarol  5mg  Ac-LEVD-AFC  500mg

HOE 32020  10mg  R162  1mg  UBE2V2 Human  5mg

Lerociclib dihydrochloride (G1T38 dihydrochloride)  50mg  MDL 105519  10μg  CP 47,497-para-quinone analog  5mg

Oxolamine citrate (SKF-9976 citrate)  50mg  Parathyroid Hormone (1-34), bovine  5g  IDNK E.Coli  10mg

錦鯉皰疹病毒熒光-PCR法干蟾皮 英文名稱TLC法鑒別 含量:120963-200504 20mg/支 DAP-5/p97  死亡相關蛋白5抗體規(guī)格: 0.1ml

千里光 英文名稱TLC法鑒別 含量:120964-200707 20mg/支 DAPK1  凋亡相關蛋白激酶1抗體規(guī)格: 0.1ml

木芙蓉葉 英文名稱TLC法鑒別 含量:120965-200703 20mg/支 DAPK2  凋亡相關蛋白激酶2抗體規(guī)格: 0.1ml

仙鶴草 英文名稱TLC法鑒別 含量:120966-200505 20mg/支 DAPK3/ZIP Kinase  凋亡相關蛋白激酶3抗體規(guī)格: 0.1ml

沒藥(天然沒藥) 英文名稱TLC法鑒別 含量:120967-200903 20mg/支 DCBLD2  內皮細胞和平滑肌細胞衍生的神經(jīng)纖毛蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

陳皮 英文名稱TLC法鑒別 含量:120969-200808 20mg/支 ANKHD1  艾滋病病毒制約錨定蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

乳香 英文名稱TLC法鑒別 含量:120970-200904 20mg/支 Deltex-1  DTX1抗體規(guī)格: 0.2ml

南板藍根 英文名稱TLC法鑒別 含量:120971- 20mg/支 envelope glycoprotein (Dengue virus type-2)  登革熱病毒抗體規(guī)格: 0.2ml

浙貝母 英文名稱TLC法鑒別 含量:120972-200404 20mg/支 ASAP3  GTP酶激活蛋白ASAP3抗體規(guī)???: 0.2ml


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