訂購信息：
產(chǎn)品名稱：阿留申病病毒PCR實(shí)驗(yàn)試劑
英文名稱：Aleutian Disease Virus(ADV)PCR
貨號：BJ-01R3249
產(chǎn)品規(guī)格：50T
運(yùn)輸：低溫
保存：負(fù)20度
有效期：一年
貨期：現(xiàn)貨
【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融，有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運(yùn)輸】：
u 樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（多凍融3次）；
u 運(yùn)輸：采用**或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
本公司產(chǎn)品僅用于科研。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
1、 酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直???在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
使用方法:
一、樣品 RNA 的制備
1、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意：可以選用本公司生產(chǎn)的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二：RT（逆轉(zhuǎn)錄）反應(yīng)合成 cDNA
1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系（20 μL 體系）
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴(yán)格按順序加入 6μL RT Buffer（含 dNTP）和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），
反應(yīng)終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應(yīng)。
5. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng)，然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用，丌需要純化。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
Martinomycin 1mg TRV-120027 TFA 100mg ML-354 10μg
Eledoisin (Eledone peptide) 1mg 7-Hydroxy-4-chromone (7-Hydroxychromone) 10mg JWH 081 3-methoxynaphthyl isomer 10mg
Homoglutathione 10μg MS049 10mg TC 14012 (trifluoroacetate salt) 50mg
PF-4693627 25mg Fmoc-Thr(GlcNAc(Ac)??β-D)-OH 10mg RGX-104 free Acid 5mg
MK-3697 10mg FTH1 Human 2μg 1,2,3-Tritricosanoyl-rac-glycerol 50mg
(-)-U-50488 hydrochloride 50mg HBV core delta 5mg PTC124(Ataluren) 10mg
Boc-Aib-OSu 10mM(in1mLDMSO) Cys-Protein-G 5mg Nesbuvir 10mM(in1mLDMSO)
CSNK2A1 Human, His 50mg ENA 78 Mouse 5mg N-Methylhydantoin 10mg
GSTZ1 Human 5mg VAMP8 Human 5mg (2S,3R,4S)-4-Hydroxyisoleucine 10mM*1mLinDMSO
MG Human 50mg ENPP1 Human 50mg SMCP Human 10mg
Thrombin Bovine 5g Borrelia Afzelii DbpA 2.5mg 2-Hydroxy-2-methylbutanoic acid 5μg
Cerestat 50mg OXA-01 50mg Hippuryl-Gly-Gly-OH 1mg
FGF 15 Mouse 1mg Docosahexaenoyl Glycine 1mg Fmoc-Phe-Arg-OH 250mg
KRT14 Human 1g ADK Mouse 10μg Brevicompanine B 10mg
Isovaleryl-Phe-Nle-Sta-Ala-Sta-OH 10mg Mestranol 25μg Windorphen 5mg
阿留申病病毒PCR實(shí)驗(yàn)試劑牡荊素 英文名稱Vitexin 含量：HPLC≥98% 20mg/支 phospho-RUNX3(Ser338) 磷酸化Runx3抗體規(guī)格: 0.1ml
（R型）人參皂苷Rg3 英文名稱Ginsenoside Rg3 含量：HPLC≥98% 20mg/支 GLUT2 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2規(guī)格: 0.1ml
（R型）原人參三醇 英文名稱Protopanaxtriol 含量：HPLC≥98% 20mg/支 Collagen II/Chondrocalcin Ⅱ型膠原α1蛋白/軟骨鈣素抗體規(guī)格: 0.1ml
雪膽素甲 英文名稱Curcurbitacin IIa 含量：HPLC≥98% 20mg/支 Collagen II/Chondrocalcin Ⅱ型膠原α1蛋白/軟骨鈣素抗體規(guī)格: 0.1ml
雪膽素乙 英文名稱Curcurbitacin Iib 含量：HPLC≥98% 20mg/支 PIM3 絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶PIM3抗體規(guī)格: 0.2ml
蔓荊子黃素 英文名稱vitexicarpin 含量：HPLC≥98% 20mg/支 Hepatitis C Virus NS5a 丙型肝炎病毒NS5A抗體規(guī)格: 0.1ml
龍血素B 英文名稱LOUREIRIN B 含量：HPLC≥98% 20mg/支 Hepatitis C Virus NS4B 丙型肝炎病毒NS4B抗體規(guī)格: 0.1ml
劍葉龍血素C 英文名稱Cochinchinenin C 含量：HPLC≥98% 20mg/支 Hepatitis C Virus RNA-directed RNA polymerase 丙型肝炎病毒NS4B（65kDa）抗體規(guī)格: 0.1ml
辛夷脂素 英文名稱demethoxyaschantin 含量：HPLC≥98% 20mg/支 SORBS2/ArgBP2 精氨酸結(jié)合蛋白2抗體規(guī)格: 0.2ml
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位)；在學(xué)中zui小檢出率為3個。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
- 溫馨提示：為規(guī)避購買風(fēng)險(xiǎn)，建議您在購買前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)與產(chǎn)品質(zhì)量。
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