微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和完全,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為種子,把種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
基本信息:
產(chǎn)品名稱:嗜鞣管囊酵母規(guī)格
拉丁文:
Pachysolen tannophilus
提供形式: 凍干物,斜面
**等級: 1
模式菌株: yes
應(yīng)用領(lǐng)域: 釀造酒精;利用戊碳糖。
培養(yǎng)基: 酵母膏 3.0g,麥芽浸膏 3.0g,蛋白胨 5.0g,葡萄糖 10.0g,瓊脂 20.0g,蒸餾水 1.0L。
傳代方法: ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。
②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
生長條件贀#
培養(yǎng)方法:
培養(yǎng)基 0012
生長條件 28℃
存儲條件 液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法
培養(yǎng)及打管說明:
1、安瓿瓶開封:用浸過75%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管,用火焰加熱其頂端,滴少量無菌水至加熱頂端使之破裂,用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。
2、菌株恢復(fù)培養(yǎng):用無菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基,滴入安瓿管內(nèi),輕輕振蕩,使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液,移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中,并在建議的條件下培養(yǎng)。
3、注意事項:菌種活化前,請將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下,某些菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后,延遲期較長,需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長
4、復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用。
5、暫不啟開的安瓿及復(fù)蘇后需保藏的斜面應(yīng)于4℃中保藏。
保藏方法:
1. 傳代培養(yǎng)保藏法
又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等(后者作保藏厭氧**用),培養(yǎng)后于4-6℃冰箱內(nèi)保存。
2. 液體石蠟覆蓋保藏法
是傳代培養(yǎng)的變相方法,能夠適當(dāng)延長保藏時間,它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋的液體石蠟,一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡,另一方面可阻止氧氣進(jìn)入,以減弱代謝作用。
3. 載體保藏法
是將微生物吸附在適當(dāng)?shù)妮d體,如土壤、沙子、硅膠、濾紙上,而后進(jìn)行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和濾紙保藏法應(yīng)用相當(dāng)廣泛。
4. 寄主保藏法
用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長的微生物,如病毒、立克次氏體、螺旋體等,它們必須在生活的動物、昆蟲、雞胚內(nèi)感染并傳代,此法相當(dāng)于一般微生物的傳代培養(yǎng)保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進(jìn)行保藏。
5. 冷凍保藏法
可分低溫冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速凍結(jié)(約-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。
6. 冷凍干燥保藏法
先使微生物在極低溫度(-70℃左右)下快速冷凍,然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分(真空干燥)。有些方法如濾紙保藏法、液氮保藏法和冷凍干燥保藏法等均需使用保護(hù)劑來制備細(xì)胞懸液,以防止因冷凍或水分不斷升華對細(xì)胞的損害。
大鼠膠原C末端肽(CTX)ELISA試劑盒 英文名: CTX ELISA Kit
大鼠橫紋肌輔肌動蛋白α(sm Actinin-α)ELISA試劑盒 英文名: sm Actinin-α ELISA Kit
大鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長因子(SCF/MGF)ELISA試劑盒 英文名: SCF/MGF ELISA Kit
大鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA試劑盒 英文名: PP ELISA Kit
大鼠丙二酸單酰輔酶A脫羧酶(MLYCD)ELISA試劑盒 英文名: MLYCD ELISA Kit
大鼠白蛋白(albumin)ELISA試劑盒 英文名: albumin ELISA Kit
大鼠N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒 英文名: NT-proBNP ELISA Kit
大鼠Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)ELISA試劑盒 英文名: Col Ⅰ ELISA Kit
大鼠組氨酸豐富糖蛋白(HRG)ELISA試劑盒 英文名: HRG ELISA Kit
嗜鞣管囊酵母規(guī)格streptomycin 鏈霉素抗體 0.2ml
Phospho-HSP27 (Ser15) 磷酸化熱休克蛋白27抗體 0.1ml
VEGFR1/FLT1 血管內(nèi)皮生長因子受體1抗體 0.1ml
Phospho-KSR1 (Ser392) 磷酸化Ras信號轉(zhuǎn)導(dǎo)KSR1蛋白抗體 0.1ml
Goat Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG 0.1ml
MMP-1 基質(zhì)金屬蛋白酶-1抗體 0.1ml
PDHB 丙酮酸脫氫酶E1β亞單位抗體 0.2ml
phospho-GATA6(Tyr271) 磷酸化GATA結(jié)合蛋白6抗體 0.1ml
Rabbit Anti-chicken IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗雞IgG 0.5ml
alpha-Synuclein(NT) 核突觸蛋白-α抗體(N端) 0.1ml
IRGM 相關(guān)鳥苷三磷酸酶基因抗體 0.2ml
Goat Anti-rabbit IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的羊抗兔IgG 0.1ml
Nm23/NME1/NME2 腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因抗體 0.1ml
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