基本信息:
產(chǎn)品名稱:嗜熱嗜氣解硫胺素芽孢桿菌培養(yǎng)
拉丁文: Aneurinibacillus│thermoaerophilus
分離基物: 砂土
提供形式: 凍干物
**等級: 1
模式菌株: no
培養(yǎng)基: 859
生長條件: 70℃
存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;其他
培養(yǎng)方法:
培養(yǎng)基 0012
生長條件 28℃
存儲條件 液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法
培養(yǎng)及打管說明:
1、安瓿瓶開封:用浸過75%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管,用火焰加熱其頂端,滴少量無菌水至加熱頂端使之破裂,用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。
2、菌株恢復(fù)培養(yǎng):用無菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基,滴入安瓿管內(nèi),輕輕振蕩,使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液,移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中,并在建議的條件下培養(yǎng)。
3、注意事項(xiàng):菌種活化前,請將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下,某些菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后,延遲期較長,需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長
4、復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用。
5、暫不啟開的安瓿及復(fù)蘇后需保藏的斜面應(yīng)于4℃中保藏。
保藏方法:
1. 傳代培養(yǎng)保藏法
又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等(后者作保藏厭氧**用),培養(yǎng)后于4-6℃冰箱內(nèi)保存。
2. 液體石蠟覆蓋保藏法
是傳代培養(yǎng)的變相方法,能夠適當(dāng)延長保藏時間,它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋的液體石蠟,一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡,另一方面可阻止氧氣進(jìn)入,以減弱代謝作用。
3. 載體保藏法
是將微生物吸附在適當(dāng)?shù)妮d體,如土壤、沙子、硅膠、濾紙上,而后進(jìn)行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和濾紙保藏法應(yīng)用相當(dāng)廣泛。
4. 寄主保藏法
用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長的微生物,如病毒、立克次氏體、螺旋體等,它們必須在生活的動物、昆蟲、雞胚內(nèi)感染并傳代,此法相當(dāng)于一般微生物的傳代培養(yǎng)保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進(jìn)行保藏。
5. 冷凍保藏法
可分低溫冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速凍結(jié)(約-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。
6. 冷凍干燥保藏法
先使微生物在極低溫度(-70℃左右)下快速冷凍,然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分(真空干燥)。有些方法如濾紙保藏法、液氮保藏法和冷凍干燥保藏法等均需使用保護(hù)劑來制備細(xì)胞懸液,以防止因冷凍或水分不斷升華對細(xì)胞的損害。
無機(jī)鹽淀粉瓊脂ISP Medium4(Inorganic Salts-Starch Agar) 250g/瓶 用于鏈霉屬的培養(yǎng)鑒定特價供應(yīng)
低限瓊脂 250g/瓶 用于分離和表現(xiàn)營養(yǎng)突變型大腸桿 的特性特價供應(yīng)
種保存培養(yǎng)基 特價供應(yīng) 用于常用細(xì)斜面?zhèn)鞔笆覝乇4?/span>
酵母 霉 青霉 曲霉 特價供應(yīng)
四硫磺酸鹽煌綠增液基礎(chǔ)(TTB) 特價供應(yīng) 250 用于沙門氏選擇性增培養(yǎng),需加入煌綠和碘液(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))
SCHAEDLER 瓊脂 特價供應(yīng) 250 用于厭氧的分離培養(yǎng)(Acumedia 方法)
Half –Fraser 添加劑 特價供應(yīng) 5ml*2 添加到HB4190中,用于李氏的選擇性增培養(yǎng)
堿性瓊脂平板 特價供應(yīng) 250 用于分離霍亂弧
酪蛋白胨 特價供應(yīng) 250 干酪素胰酶水解而成,培養(yǎng)基原材料
嗜熱嗜氣解硫胺素芽孢桿菌培養(yǎng)Mouse Anti-Goat IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的小鼠抗羊IgG 2ml
OPN/BSP 骨橋蛋白抗體(分泌型磷蛋白1) 0.1ml
Donkey Anti-human IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的驢抗人IgG 0.1ml
Shadow/shadow of prion protein 新朊蛋白抗體 0.2ml
ICAD/DFF-45 Beta Caspase激活的脫氧核糖核酸酶抑制劑抗體 0.1ml
Rabbit anti-mouse IgG-Fc fragment whole serum 兔抗小鼠IgG-Fc段抗血清 1ml
Rabbit Anti-horse IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的兔抗馬IgG 0.1ml
PLGF/PIGF (mouse, rat, pig) 胎盤生長因子抗體(小鼠、大鼠、豬) 0.1ml
MMP-12 基質(zhì)金屬蛋白酶-12抗體 0.1ml
GPX1 谷胱甘肽過氧化酶1 0.2ml
GDNF Receptor alpha 2 膠質(zhì)細(xì)胞系源性神經(jīng)營養(yǎng)因子受體α2抗體 0.1ml
LASS4 長壽相關(guān)基因lASS4抗體 0.2ml
Mouse Anti-rabbit IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的小鼠抗兔IgG 0.5ml
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和完全,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為種子,把種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
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