【友情提示】：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失，請仔細(xì)閱讀購買說明！

產(chǎn)品名稱：多酚氧化酶檢測試劑盒
規(guī)格：詳見說明
貨號：BJ-99902

客戶自備儀器和試劑：
紫外分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點(diǎn)：
       1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案，1小時即可完成
       2、靈敏度高，操作便捷
       3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑 
常見樣本處理方法：
1、血清（漿）樣品：直接檢測。
2、組織：按照組織質(zhì)量（g） ：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g組織，
加入 1mL提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

樣品制備：
1）. 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品，體積可達(dá)2.000ml。
2）. 過濾混濁溶液。
3）. 除去樣品中的CO 2 （果糖含量測試盒說明書過過濾）。
4 ）. 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ）. 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。
6 ）. 用空白樣品做對照測定有色樣品（如有必要調(diào)整PH值至8.0）。
7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。
9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10）.含脂肪的樣品用熱水提取。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則：
1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測前，要打開酶標(biāo)儀，使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時，避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板，防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時，每次洗液加入后，應(yīng)靜置1分鐘，使清洗更加徹底。沒有洗板機(jī)時，倒去液體后，要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現(xiàn)配。
Eperythrozoon ovis綿羊附紅  體（綿羊嗜血支原體）探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用） 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周

Neisseria meningitidis腦膜炎奈瑟LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周

Theileria buffeli水牛泰勒蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周

Semen alpiniae  katsumadai草豆蔻染料法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周

Clostridium novyi諾氏梭狀芽孢桿LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周

Cephalosporium spp.頭孢霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周

Caulis lonicerae忍冬藤探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周

Omsk Hemorrhagic Fever Virus(OHFV)鄂木斯克出血熱病毒RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周

Bunostomum phlebotomum牛仰口線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周

Influenza Virus A甲型流感（禽流感）病毒H7N4亞型染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用） 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周

鴕鳥源性成分LAMP試劑盒 種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周

Human Coronavirus(HCoV-229E)人229E 探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周

Prune Dwarf Virus(PDV)李矮縮病毒RT-PCR試劑盒 植物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周

多酚氧化酶檢測試劑盒1g 氯霉素干粉 Chloramphenicol Powder 4℃保存人 ASPH 基因全長ORF克隆

10mL 氯霉素溶液,25mg/mL Chloramphenicol Solution -20℃避光保存人 COMMD2 基因全長ORF克隆

1mL 環(huán)孢霉素A溶液,10mg/mL Cyclosporin A Solution -20℃避光保存人 VBP1 基因全長ORF克隆

1mL 地塞米松溶液,50mg/mL Dexamethasone DXM Solution -20℃避光保存人 MSRB3 基因全長ORF克隆

0.1mL   松弛素B溶液,20mg/mL Cytochalasin B Solution -20℃避光保存人 SPATA24 基因全長ORF克隆

10mL 紅霉素溶液,100mg/mL Erythromycin Solution -20℃避光保存人 CGGBP1 基因全長ORF克隆

100mg 遺傳霉素（G418）干粉 G418 Sulfate (Geneticin) Powder 4℃避光保存人 NUDT10 基因全長ORF克隆

250mg 潮霉素B干粉 Hygromycin B Powder 4℃避光保存人 MED22 基因全長ORF克隆

2mL 硫酸慶大霉素溶液,15mg/mL Gentamycin Sulfate Solution -20℃避光保存人 CRCP 基因全長ORF克隆

10mL 硫酸卡那霉素溶液,50mg/mL Kanamycin Sulfate Solution -20 ℃避光保存人 ASCC3 基因全長ORF克隆

1g 硫酸卡那霉素干粉 Kanamycin Sulfate Powder 4℃避光保存人 ATP5J 基因全長ORF克隆

1mL C溶液,5mg/mL Mitomycin Solution  4℃避光保存人 CDC26 基因全長ORF克隆

操作步驟(僅供參考)：  
1.配制65mM H2O2基液：本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過 氧化氫不是非常穩(wěn)定，使用前需自行測定過氧化氫的實(shí)際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍，使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準(zhǔn)備樣品：  
a,細(xì)胞或組織樣品：取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進(jìn)行裂解，可以采用Leagene Western及IP 細(xì)胞裂解液，如果有必要需進(jìn)行適當(dāng)勻漿，低速離心取上清，-70℃凍存，用于CAT的檢測。  
b,血漿、血清和尿液樣品：血漿、血清按照常規(guī)方法制備，用生理鹽水10倍稀釋后， 可以直接用于本試劑盒的測定，尿液通常也可以直接用于測定，-70℃凍存，用于CAT的檢測。  
c,全血樣品：收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi)，顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次，用CAT Assay buffer1000倍后進(jìn)行CAT檢測。
d,血液中的紅細(xì)胞裂解液：用抗凝管收集血液，顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min，棄上清，沉淀用預(yù)冷的生理鹽水洗滌3次。  
e,高活性樣品：如果樣品中含有較高活性的CAT，可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度，以便于后續(xù) 計(jì)算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)的CAT含量。  
3、 CAT檢測：按照下表設(shè)置空白管、自身對照管、測定管，溶液應(yīng)按照順序依次加入，并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過高，可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測定。樣品的檢測能設(shè)置平行孔。
4、分光光度計(jì)檢測405nm處吸光度，分光光度計(jì)比色杯光徑0.5cm。如果沒有分光光度計(jì)，亦可用酶標(biāo)儀檢測，但如果有條件，盡量采用分光光度計(jì)檢測。蒸餾水調(diào)零，讀取各管吸光度值。一般應(yīng)數(shù)小時內(nèi)檢測完畢。

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