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產(chǎn)品名稱(chēng)：丙酮酸脫羧酶檢測(cè)試劑盒
規(guī)格：詳見(jiàn)說(shuō)明
貨號(hào)：BJ-99892

客戶自備儀器和試劑：
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點(diǎn)：
       1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案，1小時(shí)即可完成
       2、靈敏度高，操作便捷
       3、試劑盒提供檢測(cè)果糖所需的全套試劑 
常見(jiàn)樣本處理方法：
1、血清（漿）樣品：直接檢測(cè)。
2、組織：按照組織質(zhì)量（g） ：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱(chēng)取約 0.1g組織，
加入 1mL提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

樣品制備：
1）. 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品，體積可達(dá)2.000ml。
2）. 過(guò)濾混濁溶液。
3）. 除去樣品中的CO 2 （果糖含量測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)過(guò)過(guò)濾）。
4 ）. 果糖含量測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)過(guò)加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ）. 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。
6 ）. 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品（如有必要調(diào)整PH值至8.0）。
7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。
9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10）.含脂肪的樣品用熱水提取。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則：
1、洗液不夠時(shí)，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒，混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對(duì)皮膚有腐蝕性，應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前，要打開(kāi)酶標(biāo)儀，使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí)，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí)，避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí)，要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板，防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí)，每次洗液加入后，應(yīng)靜置1分鐘，使清洗更加徹底。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí)，倒去液體后，要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快，以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現(xiàn)配。
Orientia tsutsugamushi恙蟲(chóng)病東方體探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 1-2周

Flos farfarae款冬花LAMP鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周

Human Parainfluenza Virus 4B(HPIV-4B)人副流感病毒4B型RT-LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周

Nematodirus helvetianus微黃細(xì)頸線蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周

Pollen typhae蒲黃LAMP鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周

Borna Disease Virus(BDV)博爾納病病毒RT-LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周

Leishmania braziliensis巴西利什曼蟲(chóng) 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周

Penicillium rugulosum皺褶青霉探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周

Rhizoma polygonati黃精染料法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周

Capillaria obsignata封閉毛細(xì)線蟲(chóng)LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周

Bartonella quintana五日熱巴爾通體探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研??）/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周

Herba moslae香薷探針?lè)≒CR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周

Besnoitia besnoiti貝氏貝諾孢子蟲(chóng)LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周

丙酮酸脫羧酶檢測(cè)試劑盒100次 真細(xì)種屬鑒定 PCR Mix 2（rDNA） Bacterial DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存人 SH3BP4 基因全長(zhǎng)ORF克隆

100次 古細(xì)+真細(xì)種屬鑒定 PCR Mix 3（rDNA） Bacterial DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存人 AGTPBP1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

100次 枯草桿 PCR Mix 4（SSU） Bacterial DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存人 MORC1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

100次 鏈霉 PCR Mix 6（RPB2） Bacterial DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存人 IGF2BP3 基因全長(zhǎng)ORF克隆

100次 高GC革氏陽(yáng)性細(xì) PCR Mix 5（RPB1） Bacterial DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存人 MID1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

100uL 氨芐抗性基因PCR引物 Common PCR Primer -20℃保存人 FRMD5 基因全長(zhǎng)ORF克隆

100uL 菠菜RT-PCR引物 Common PCR Primer -20℃保存人 MCCC2 基因全長(zhǎng)ORF克隆

100uL 潮霉素抗性基因PCR引物 Common PCR Primer -20℃保存人 PRF1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

100uL 卡拉霉素抗性基因PCR引物 Common PCR Primer -20℃保存人 NAB2 基因全長(zhǎng)ORF克隆

100uL 蘋(píng)果actin PCR引物 Common PCR Primer -20℃保存人 ATP6V1B1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

100uL 萬(wàn)古霉素VanA抗性基因PCR引物 Common PCR Primer -20℃保存人 PLVAP 基因全長(zhǎng)ORF克隆

100uL 小麥Zein基因PCR引物 Common PCR Primer -20℃保存人 HCFC1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

操作步驟(僅供參考)：  
1.配制65mM H2O2基液：本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過(guò) 氧化氫不是非常穩(wěn)定，使用前需自行測(cè)定過(guò)氧化氫的實(shí)際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍，使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準(zhǔn)備樣品：  
a,細(xì)胞或組織樣品：取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進(jìn)行裂解，可以采用Leagene Western及IP 細(xì)胞裂解液，如果有必要需進(jìn)行適當(dāng)勻漿，低速離心取上清，-70℃凍存，用于CAT的檢測(cè)。  
b,血漿、血清和尿液樣品：血漿、血清按照常規(guī)方法制備，用生理鹽水10倍稀釋后， 可以直接用于本試劑盒的測(cè)定，尿液通常也可以直接用于測(cè)定，-70℃凍存，用于CAT的檢測(cè)。  
c,全血樣品：收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi)，顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次，用CAT Assay buffer1000倍后進(jìn)行CAT檢測(cè)。
d,血液中的紅細(xì)胞裂解液：用抗凝管收集血液，顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min，棄上清，沉淀用預(yù)冷的生理鹽水洗滌3次。  
e,高活性樣品：如果樣品中含有較高活性的CAT，可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒測(cè)定蛋白濃度，以便于后續(xù) 計(jì)算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)的CAT含量。  
3、 CAT檢測(cè)：按照下表設(shè)置空白管、自身對(duì)照管、測(cè)定管，溶液應(yīng)按照順序依次加入，并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過(guò)高，可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。樣品的檢測(cè)能設(shè)置平行孔。
4、分光光度計(jì)檢測(cè)405nm處吸光度，分光光度計(jì)比色杯光徑0.5cm。如果沒(méi)有分光光度計(jì)，亦可用酶標(biāo)儀檢測(cè)，但如果有條件，盡量采用分光光度計(jì)檢測(cè)。蒸餾水調(diào)零，讀取各管吸光度值。一般應(yīng)數(shù)小時(shí)內(nèi)檢測(cè)完畢。

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