組成結(jié)構(gòu):
1、 血清:操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)**的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2、 血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細(xì)胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。
5、 保存:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
此IBL試劑盒能用于小鼠血清,EDTA血漿,細(xì)胞上清中白介素-6的定量檢測
產(chǎn)品名稱:卵清蛋白特異性IgG試劑盒
產(chǎn)品貨號:BJ-105315
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
產(chǎn)品保存:2-8℃,有效期6個月
主要組成成分:試劑
性狀:液體
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
96T指可以做94個標(biāo)本,2個標(biāo)準(zhǔn)對照
48T指可以做47個標(biāo)本,1個標(biāo)準(zhǔn)對照
96T-84個樣本
48T-42個樣本
待檢樣本:體液,血清,血漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液,尿液,組織勻漿,心房水標(biāo)本等等。
本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
樣品收集、處理及保存方法
1)血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)**的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3)細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
試劑盒成分:
1 預(yù)包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 96T
2 酶標(biāo)記抗體: (30倍濃縮)HRP標(biāo)記抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 0.4mL x 1
3 標(biāo)準(zhǔn)品: 重組小鼠白介素-6 0.5mL x 2
4 EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1
5 標(biāo)記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1
6 顯色劑: TMB底物液 15mL x 1
7 終止液: 1N硫酸 12mL x 1
8 濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1 操作說明 1實驗所需器材(但試劑盒沒有提供) 酶標(biāo)儀(450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及燒杯 去離子水 冰箱(4°C) 坐標(biāo)紙(log/log) 吸水紙 試管(用于標(biāo)準(zhǔn)品稀釋) 溫育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性試劑管(用于濃縮酶標(biāo)記抗體和顯色劑)
ELISA 試驗時,注意事項如下:
1. 正式試驗時,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進(jìn)行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋??質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要**價廉、**、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。
L-丙氨酸L-Alanine (cell culture tested, ≥98.5%)56-41-725G
L-丙氨酸 (標(biāo)準(zhǔn)品)L-Alanine Standard Substance (≥99.5%)56-41-71G
N-苯甲酰-L-酪氨酸...N-Benzoyl-L-tyrosine ethyl ester (BTEE...3483-82-71G
L-半胱氨酸鹽酸鹽L-Cysteine hydrochloride (cell culture...52-89-125G
甘氨酸Glycine (ReagentPlus,≥99% ,TLC)56-40-6100G
甘氨酸 (分子生物級)Glycine (for molecular biology,≥99.0%)56-40-650G
甘氨酸 (電泳級)Glycine (≥99% ,for electrophoresis)56-40-6500G
甘氨酸 (標(biāo)準(zhǔn)品)Glycine Standard Substance (≥99.7%)56-40-61G
L-白氨酸L-Norleucine (≥98%, TLC)327-57-11G
L-白氨酸 (標(biāo)準(zhǔn)品)L-Norleucine Standard Substance (≥99....327-57-1500MG
多聚-L-鳥氨酸 (分...Poly-L-ornithine hydrochloride27378-49-010MG原裝
L-羥脯氨酸t(yī)rans-4-Hydroxy-L-proline (cell cultur...51-35-45G
卵清蛋白特異性IgG試劑盒Rabbit anti-mouse Kappa light chain/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 規(guī)格: 0.1mlCDK7 周期素依賴性激酶7抗體 規(guī)格: 0.1ml
SFRP1 分泌型卷曲相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1mlC11orf74 11號染色體開放閱讀框74抗體 規(guī)格: 0.2ml
PRAME 黑色素瘤優(yōu)先表達(dá)抗原抗體 規(guī)格: 0.2mlLRRN5 富含亮氨酸重復(fù)神經(jīng)元5抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-C-Myc(Thr373) 磷酸化致基因C-Myc抗體 規(guī)格: 0.2mlIRF4 干擾素調(diào)節(jié)因子4抗體 規(guī)格: 0.2ml
HSP105 熱休克蛋白105抗體 規(guī)格: 0.1mlMouse Anti-Bov IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗牛IgG 規(guī)格: 0.1ml
ARRDC3 抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2mlET-1 內(nèi)皮素-1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Defensin β2/DEFB2/HBD-2 防御素β2抗體 規(guī)格: 0.1mlC1orf93 1號染色體開放閱讀框93抗體 規(guī)格: 0.2ml
SNF5 轉(zhuǎn)錄調(diào)控激活蛋白SNF5抗體 規(guī)格: 0.2mlCCR-3 細(xì)胞表面趨化因子受體3抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-CK18(Ser74) 磷酸化細(xì)胞角蛋白18抗體 規(guī)格: 0.1mlNOS-2/iNOS 氮合成酶-2抗體(誘導(dǎo)型) 規(guī)格: 0.1ml
MEGF5/Slit3 復(fù)合型表皮生因子樣結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體 規(guī)格: 0.2mlHistone H3-like protein 組蛋白H3樣抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-ASK1(Ser967) 磷酸化細(xì)胞凋亡信號調(diào)節(jié)激酶1抗體 規(guī)格: 0.2mlKLK12 激肽釋放酶12抗體 規(guī)格: 0.1ml
PICK1 蛋白激酶Cα相互作用蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-Acinus(Ser1180) 磷酸化泡Acinus蛋白抗體 0.1ml
Goat Anti-Mouse IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗小鼠IgM 規(guī)格: 0.1mlArfaptin 1 ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml
CD10/CALLA/Neprilysin CD10抗體 規(guī)格: 0.1mlChloramphenicol 氯霉素抗體 規(guī)格: 0.2ml
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