ELISA 試驗時,注意事項如下:
1. 正式試驗時,應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實驗結果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質包被的zui適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要**價廉、**、有明顯地顯色反應,而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。
產品名稱:大鼠誘導型NO合酶ELISA檢測試劑盒
英文名稱:Tumor necrosis factor receptor type 1-associated DEATH domain protein
檢測范圍:62.5ng/mL~2000pg/mL
靈敏度:10
產品貨號:BJ-R70183
產品規(guī)格:48T/96T
產品保存:2-8℃,有效期6個月
主要組成成分:試劑
性狀:液體
產品規(guī)格:96T/48T
96T指可以做94個標本,2個標準對照
48T指可以做47個標本,1個標準對照
96T-84個樣本
48T-42個樣本
待檢樣本:體液,血清,血漿,細胞培養(yǎng)上清液,尿液,組織勻漿,心房水標本等等。
本公司產品僅用于科研實驗。
樣品收集、處理及保存方法
1)血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內**的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3)細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
組成結構:
1、 血清:操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內**的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。
2、 血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。
5、 保存:如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或??高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
此IBL試劑盒能用于小鼠血清,EDTA血漿,細胞上清中白介素-6的定量檢測
試劑盒成分:
1 預包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 96T
2 酶標記抗體: (30倍濃縮)HRP標記抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 0.4mL x 1
3 標準品: 重組小鼠白介素-6 0.5mL x 2
4 EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1
5 標記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1
6 顯色劑: TMB底物液 15mL x 1
7 終止液: 1N硫酸 12mL x 1
8 濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1 操作說明 1實驗所需器材(但試劑盒沒有提供) 酶標儀(450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及燒杯 去離子水 冰箱(4°C) 坐標紙(log/log) 吸水紙 試管(用于標準品稀釋) 溫育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性試劑管(用于濃縮酶標記抗體和顯色劑)
5,6-環(huán)氧-13-順式視黃酸 5,6-Epoxy-13-cis Retinoic Acid 81444-57-7 質量規(guī)格:美國進口
外消旋全反式4-羥基視黃酸 rac all-trans 4-Hydroxy Retinoic Acid 66592-72-1 質量規(guī)格:美國進口
9-順式視黃醇β-D-葡萄糖苷酸 9-cis Retinoyl β-D-Glucuronide 153321-67-6 質量規(guī)格:美國進口
4-酮基9-順式-甲酯視黃酸 4-Keto 9-cis Retinoic Acid Methyl Ester 163955-59-7 質量規(guī)格:美國進口
全反式 5,6-環(huán)氧視黃酸 all-trans 5,6-Epoxy Retinoic Acid 13100-69-1 質量規(guī)格:美國進口
9-順式-視黃酸 9-cis-Retinoic acid 1241893 質量規(guī)格:美國進口
4-酮基13-順式-視黃酸 4-Keto 13-cis-Retinoic Acid 71748-58-8 質量規(guī)格:美國進口
4-酮基9-順式視黃酸 4-Keto 9-cis Retinoic Acid 150737-18-1 質量規(guī)格:美國進口
全反式4-酮基視黃酸 all-trans 4-Keto Retinoic Acid 38030-57-8 質量規(guī)格:美國進口
5,8-環(huán)氧-13-順式視黃酸(非對映異構體混合物) 5,8-Epoxy-13-cis Retinoic Acid(Mixture of Diastereomers) 112018-12-9 質量規(guī)格:美國進口 全反式5,8-環(huán)氧視黃酸 (非對映異構體混合物) all-trans 5,8-Epoxy Retinoic Acid (Mixture of Diastereomers) 3012-76-8 質量規(guī)格:美國進口 去羥基比卡魯胺 Deshydroxy Bicalutamide 906008-94-4 質量規(guī)格:美國進口
去氟比卡魯胺 Desfluoro Bicalutamide 90357-05-4 質量規(guī)格:美國進口
(S)-比卡魯胺 (S)-Bicalutamide 113299-38-0 質量規(guī)格:美國進口
大鼠誘導型NO合酶ELISA檢測試劑盒大鼠 MAP1LC3B 基因全長ORF克隆Jak3 蛋白酪氨酸激酶JAK-3抗體規(guī)格: 0.1ml
大鼠 FBXO8 基因全長ORF克隆Phospho-Jak3 (Tyr785) 磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-3抗體規(guī)格: 0.1ml
大鼠 GJB1 基因全長ORF克隆Phospho-Jak3 (Tyr980/981) 磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-3抗體規(guī)格: 0.1ml
大鼠 RGD1359310 基因全長ORF克隆JMJD1B 組蛋白去甲基轉移酶JMJD1B抗體規(guī)格: 0.1ml
大鼠 TMEM33 基因全長ORF克隆JNK1/3 氨基末端激酶1/3抗體規(guī)格: 0.1ml
大鼠 LAMTOR1 基因全長ORF克隆JNK2 氨基末端激酶2抗體規(guī)格: 0.2ml
大鼠 RAB7A 基因全長ORF克隆phospho-MAPK8/MAPK9( Thr183+Tyr185) 磷酸化氨基末端激酶2抗體規(guī)格: 0.1ml
大鼠 CRCP 基因全長ORF克隆JNK3/MAPK10 氨基末端激酶3抗體規(guī)格: 0.1ml
大鼠 HAAO 基因全長ORF克隆Jab1 Jun激活區(qū)域-連接蛋白1抗體規(guī)格: 0.1ml
大鼠 TNFAIP6 基因全長ORF克隆phospho-JNK1/2/3(Thr183+Thr185) 磷酸化氨基末端激酶1/2/3抗體規(guī)格: 0.1ml
大鼠 ATP6V0D1 基因全長ORF克隆JNK1/2/3 氨基末端激酶1/2/3抗體規(guī)格: 0.1ml
大鼠 PNLIPRP1 基因全長ORF克隆JAM1 連接粘附分子1抗體規(guī)格: 0.1ml
大鼠 TUBB2A 基因全長ORF克隆KAT2B/ GCN5/PCAF 組蛋白乙酰轉移酶PCAF抗體規(guī)格: 0.1ml
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