操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測(cè)定過氧化氫的實(shí)際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準(zhǔn)備樣品:
a,細(xì)胞或組織樣品:取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進(jìn)行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細(xì)胞裂解液,如果有必要需進(jìn)行適當(dāng)勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測(cè)。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測(cè)定,尿液通常也可以直接用于測(cè)定,-70℃凍存,用于CAT的檢測(cè)。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi),顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進(jìn)行CAT檢測(cè)。
d,血液中的紅細(xì)胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預(yù)冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒測(cè)定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計(jì)算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)的CAT含量。
3、 CAT檢測(cè):按照下表設(shè)置空白管、自身對(duì)照管、測(cè)定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。樣品的檢測(cè)能設(shè)置平行孔。
4、分光光度計(jì)檢測(cè)405nm處吸光度,分光光度計(jì)比色杯光徑0.5cm。如果沒有分光光度計(jì),亦可用酶標(biāo)儀檢測(cè),但如果有條件,盡量采用分光光度計(jì)檢測(cè)。蒸餾水調(diào)零,讀取各管吸光度值。一般應(yīng)數(shù)小時(shí)內(nèi)檢測(cè)完畢。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買說明!
產(chǎn)品名稱:谷胱甘肽還原酶(GR)活性測(cè)定試劑盒
規(guī)格:詳見說明
測(cè)試方法:詳見說明
客戶自備儀器和試劑:
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點(diǎn):
1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案,1小時(shí)即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測(cè)果糖所需的全套試劑
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測(cè)試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測(cè)試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
D-谷氨酰胺 D-Glutamine 5959-95-5 質(zhì)量規(guī)格:0.98 體液誘導(dǎo)型巨噬細(xì)胞合成酶(iNOS /NOS2/mNOS)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次
扎托布洛芬 Zaltoprofen 74711-43-6;89482-00-8 質(zhì)量規(guī)格:>98% 細(xì)胞結(jié)構(gòu)型內(nèi)皮細(xì)胞合成酶(cNOS/NOS3/eNOS)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次
甘膽酸鈉 ;甘氨膽酸鈉 Sodium Glycocholate Hydrate 863-57-0;338950-81-5 質(zhì)量規(guī)格:>98% 組織結(jié)構(gòu)型內(nèi)皮細(xì)胞合成酶(cNOS/NOS3/eNOS)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次
甘露醇;D-甘露糖醇 Mannitol;D-Mannitol 69-65-8 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 血液結(jié)構(gòu)型內(nèi)皮細(xì)胞合成酶(cNOS/NOS3/eNOS)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次
D-半胱氨酸鹽酸鹽一水 D-Cysteine hydrochloride monohydrate 32443-99-5 質(zhì)量規(guī)格:純度大于98%,BR,一水物 體液結(jié)構(gòu)型內(nèi)皮細(xì)胞合成酶(cNOS/NOS3/eNOS)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次
鈣蛋白酶抑制劑II(進(jìn)口) Calpain Inhibitor II(ALLM) 136632-32-1 質(zhì)量規(guī)格:≥95%,美國(guó)進(jìn)口 細(xì)胞黃嘌呤氧化酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次
炔孕酮/妊娠素(標(biāo)準(zhǔn)品) Ethisterone 434-03-7 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 組織黃嘌呤氧化酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次
炔孕酮/妊娠素 Ethisterone 434-03-7 質(zhì)量規(guī)格:>98% 體液黃嘌呤氧化酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次
D-胱氨酸 D-Cystine 349-46-2 質(zhì)量規(guī)格:0.98 細(xì)胞黃嘌呤氧化酶活性熒光定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次
DL-色氨酸 DL-Tryptophan 20064 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 組織黃嘌呤氧化酶活性熒光定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次
DL-絲氨酸 DL-Serine 302-84-1 質(zhì)量規(guī)格:>98%,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 體液黃嘌呤氧化酶活性熒光定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次
L-蛋氨酸;甲硫氨酸 L-Methionine 63-68-3 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 細(xì)胞單胺氧化酶(MAO)總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次
DL-苯丙氨酸 DL-Phenylalanine 150-30-1 質(zhì)量規(guī)格:>98,BR 組織單胺氧化酶(MAO)總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次
DL-天冬酰胺,一水 DL-Asparagine monohydrate 3130-87-8 質(zhì)量規(guī)格:>99% 體液?jiǎn)伟费趸福∕AO)總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次
谷胱甘肽還原酶(GR)活性測(cè)定試劑盒小鼠滲透性糖蛋白(Pgp)ELISA試劑盒 英文名: Pgp ELISA Kit
小鼠甲基化酶(Methylase)ELISA試劑盒 英文名: Methylase ELISA Kit
小鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒 英文名: GIP ELISA Kit
大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體1(TRAIL-R1)ELISA試劑盒 英文名: TRAIL-R1 ELISA Kit
大鼠凝血因子Ⅴ(F5)ELISA試劑盒 英文名: F5 ELISA Kit
小鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(c-MET/HGFR)ELISA試劑盒 英文名: c-MET/HGFR ELISA Kit
小鼠促胰液素(SCT)ELISA試劑盒 英文名: SCT ELISA Kit
豚鼠調(diào)節(jié)激活正常T-細(xì)胞表達(dá)分泌因子(RANTES)ELISA試劑盒 英文名: RANTES ELISA Kit
小鼠核因子I/B(NFIB)ELISA試劑盒 英文名: NFIB ELISA Kit
大鼠白細(xì)胞介素13(IL-13)ELISA試劑盒 英文名: IL-13 ELISA Kit
小鼠甘露糖結(jié)合凝集素(MBL)ELISA試劑盒 英文名: MBL ELISA Kit
大鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子AA(PDGF-AA)ELISA試劑盒 英文名: PDGF-AA ELISA Kit
大鼠甲腺原氨酸脫酶Ⅲ(DIO3)ELISA試劑盒 英文名: DIO3 ELISA Kit
小鼠微管蛋白α3A(TUBα3A)ELISA試劑盒 英文名: TUBα3A ELISA Kit
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