操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測定過氧化氫的實際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準(zhǔn)備樣品:
a,細(xì)胞或組織樣品:取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進(jìn)行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細(xì)胞裂解液,如果有必要需進(jìn)行適當(dāng)勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測定,尿液通常也可以直接用于測定,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi),顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進(jìn)行CAT檢測。
d,血液中的紅細(xì)胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預(yù)冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)的CAT含量。
3、 CAT檢測:按照下表設(shè)置空白管、自身對照管、測定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測定。樣品的檢測能設(shè)置平行孔。
4、分光光度計檢測405nm處吸光度,分光光度計比色杯光徑0.5cm。如果沒有分光光度計,亦可用酶標(biāo)儀檢測,但如果有條件,盡量采用分光光度計檢測。蒸餾水調(diào)零,讀取各管吸光度值。一般應(yīng)數(shù)小時內(nèi)檢測完畢。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細(xì)閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱:syk (Ab-323) Antibody
規(guī)格:詳見說明
測試方法:詳見說明
客戶自備儀器和試劑:
紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點:
1、優(yōu)化設(shè)計的實驗方案,1小時即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
實驗通用規(guī)則:
1、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
7、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時,每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
[Tyr9]- β-促黑 (豬) [Tyr9]- β-MSH (porcine) 198281-81-1 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR L-蘋果酸待測樣品處理試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
α-心鈉素(1-28), human α-ANF(1-28), human 91917-63-4 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 口香糖阿糖醇比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
α-促黑 α-MSH 581-05-5 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 食品添加劑??糖醇比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
β-淀粉樣蛋白(1-42),人 β-Amyloid Peptide (1-42), human 107761-42-2 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 通用型果膠化學(xué)比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
β-淀粉樣蛋白(25-35) β-Amyloid (25-35) 131602-53-4] 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 果類果膠化學(xué)比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
β-促黑,人 β-MSH, human 17908-57-5 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 飲料果膠化學(xué)比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
β-促黑,猴 β-MSH, monkey 17750-75-3 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 食物果膠化學(xué)比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
Ac-垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38,人,小鼠,綿羊,豬,大鼠 Ac-PACAP-38 (human, mouse,ovine, porcine, rat) 156106-32-0 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 乳品果膠化學(xué)比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
Ac-YVAD-肽核酸 Ac-YVAD-pNA 149231-66-3 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 通用型果膠生物酶比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
促腎上腺皮質(zhì)(1-10),人 ACTH (1-10), human 325553 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 果類果膠生物酶比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
促腎上腺皮質(zhì)(1-13),人 ACTH (1-13), human 22006-64-0 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 飲料果膠生物酶比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
促腎上腺皮質(zhì)(1-16),人 ACTH (1-16), human 5576-42-1 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 食物果膠生物酶比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
促腎上腺皮質(zhì)(1-17),人 ACTH (1-17), human 7266-47-9 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 乳品果膠生物酶比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
促腎上腺皮質(zhì)(1-24), 人 ACTH (1-24), human 16960-16-0 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 面食植酸比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
syk (Ab-323) Antibody大鼠蛋白激酶G(PKG)ELISA試劑盒 英文名: PKG ELISA Kit
小鼠神經(jīng)絲蛋白L(NF-L)ELISA試劑盒 英文名: NF-L ELISA Kit
小鼠Wolfram綜合征蛋白1(WFS1)ELISA試劑盒 英文名: WFS1 ELISA Kit
大鼠乳過氧化物酶(LPO)ELISA試劑盒 英文名: LPO ELISA Kit
小鼠著絲粒蛋白H(CENPH)ELISA試劑盒 英文名: CENPH ELISA Kit
大鼠內(nèi)皮素轉(zhuǎn)換酶1(ECE1)ELISA試劑盒 英文名: ECE1 ELISA Kit
豚鼠過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物酶(LPO)ELISA試劑盒 英文名: LPO ELISA Kit
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP3)ELISA試劑盒 英文名: MMP3 ELISA Kit
大鼠5-羥色胺轉(zhuǎn)運體(5-HTT/SERT)ELISA試劑盒 英文名: 5-HTT/SERT ELISA Kit
小鼠骨粘連蛋白(ON)ELISA試劑盒 英文名: ON ELISA Kit
大鼠胰脂肪酶(PL)ELISA試劑盒 英文名: PL ELISA Kit
大鼠鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶Ⅱα(CAMK2α)ELISA試劑盒 英文名: CAMK2α ELISA Kit
小鼠纖維蛋白原(FG)ELISA試劑盒 英文名: FG ELISA Kit
大鼠高密度脂蛋白(HDL)ELISA試劑盒 英文名: HDL ELISA Kit
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