操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測定過氧化氫的實際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準備樣品:
a,細胞或組織樣品:取恰當細胞或組織進行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細胞裂解液,如果有必要需進行適當勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測定,尿液通常也可以直接用于測定,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi),顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進行CAT檢測。
d,血液中的紅細胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計算單位蛋白重量組織或細胞內(nèi)的CAT含量。
3、 CAT檢測:按照下表設置空白管、自身對照管、測定管,溶液應按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過高,可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定。樣品的檢測能設置平行孔。
4、分光光度計檢測405nm處吸光度,分光光度計比色杯光徑0.5cm。如果沒有分光光度計,亦可用酶標儀檢測,但如果有條件,盡量采用分光光度計檢測。蒸餾水調(diào)零,讀取各管吸光度值。一般應數(shù)小時內(nèi)檢測完畢。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱:PI3K P85 α/γ/β (Ab-467/199/464) Antibody
規(guī)格:詳見說明
測試方法:詳見說明
客戶自備儀器和試劑:
紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點:
1、優(yōu)化設計的實驗方案,1小時即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
實驗通用規(guī)則:
1、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開酶標儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
7、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
月桂酸乙酯(>98%,BR) Ethyl dodeconoate 106-33-2 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR CRASP基因甲基化程度定量分析試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
乙基曙紅(>95%,BS) Ethyl eosin 1628740 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BS MLH1基因甲基化程度定量分析試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
沒食子酸乙酯 Ethyl gallate 831-61-8 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR NEUROG基因甲基化程度定量分析試劑盒盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
煙酸乙酯(>98%,BR) Ethyl nicotinate 614-18-6 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR MGMT基因甲基化程度定量分析試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
二茂鐵 Ferrocene 102-54-5 質(zhì)量規(guī)格:>98% 組蛋白H2A-K5乙酰化檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次等
反苯環(huán)丙胺鹽酸鹽;單胺氧化酶(MAO)抑制劑 Tranylcypromine (2-PCPA) HCl 1986-47-6 質(zhì)量規(guī)格:>97%,單胺氧化酶(MAO)抑制劑 組蛋白H2A-K9乙酰化檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次等
黃胺酸(>96.5%,BS) Flavianic acid hydrate 483-84-1 質(zhì)量規(guī)格:>96.5%,BS 組蛋白H2B-K5乙?;瘷z測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次等
酸性品紅鈣(>60%,BS) Fuchsin acid calcium salt 123334-10-1 質(zhì)量規(guī)格:>60%,BS 組蛋白H2B-K12乙?;瘷z測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次等
加拉碘銨(>98%,BR) Gallamine triethiodide 65-29-2 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 組蛋白H2B-K16乙?;瘷z測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次等
D-氨基葡萄糖硫酸鈉鹽 GlcN-2S, D-Glucosamine-2-sulfate sodium salt 38899-05-7 質(zhì)量規(guī)格:>96%,BR 組蛋白H2B-K46乙酰化檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次等
葡萄糖-6-磷酸脫氫酶 Glucose-6-phosphate dehydrogenase 9001-40-5 質(zhì)量規(guī)格:酶活:>200 NADP units/mg,BC 組蛋白H2B-K120乙?;瘷z測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次等
戊二酸(>98%,BR) Glutaric acid 110-94-1 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 組蛋白H3乙?;瘷z測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次等
戊二酸酐(>96%,BR) Glutaric anhydride 108-55-4 質(zhì)量規(guī)格:>96%,BR 組蛋白H3-K4乙酰化檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次等
三醋酸甘油酯(>98%,BR) Glycerol triacetate 102-76-1 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 組蛋白H3-K14乙?;瘷z測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次等
PI3K P85 α/γ/β (Ab-467/199/464) Antibody大鼠甲狀腺過氧化物酶(TPO)ELISA試劑盒 英文名: TPO ELISA Kit
小鼠胰島素原(PI)ELISA試劑盒 英文名: PI ELISA Kit
小鼠二肽基肽酶8(DPP8)ELISA試劑盒 英文名: DPP8 ELISA Kit
大鼠血幼素(HJV)ELISA試劑盒 英文名: HJV ELISA Kit
小鼠白介素8(IL-8)ELISA試劑盒 英文名: IL-8 ELISA Kit
大鼠維生素K1(VK1)ELISA試劑盒 英文名: VK1 ELISA Kit
大鼠白介素2受體α(IL2Rα)ELISA試劑盒 英文名: IL2Rα ELISA Kit
小鼠葡萄糖6磷酸異構(gòu)酶(GPI)ELISA試劑盒 英文名: GPI ELISA Kit
大鼠白細胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA試劑盒 英文名: ALCAM ELISA Kit
小鼠內(nèi)(ET)ELISA試劑盒 英文名: ET ELISA Kit
小鼠DNA損傷誘導轉(zhuǎn)錄因子3(DDIT3)ELISA試劑盒 英文名: DDIT3 ELISA Kit
大鼠硫氧還蛋白還原酶1(TrxR1)ELISA試劑盒 英文名: TrxR1 ELISA Kit
小鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒 英文名: IL-12/P70 ELISA Kit
大鼠可溶性CD14(sCD14)ELISA試劑盒 英文名: sCD14 ELISA Kit
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