操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過(guò) 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測(cè)定過(guò)氧化氫的實(shí)際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準(zhǔn)備樣品:
a,細(xì)胞或組織樣品:取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進(jìn)行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細(xì)胞裂解液,如果有必要需進(jìn)行適當(dāng)勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測(cè)。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測(cè)定,尿液通常也可以直接用于測(cè)定,-70℃凍存,用于CAT的檢測(cè)。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi),顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進(jìn)行CAT檢測(cè)。
d,血液中的紅細(xì)胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預(yù)冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒測(cè)定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計(jì)算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)的CAT含量。
3、 CAT檢測(cè):按照下表設(shè)置空白管、自身對(duì)照管、測(cè)定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過(guò)高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。樣品的檢測(cè)能設(shè)置平行孔。
4、分光光度計(jì)檢測(cè)405nm處吸光度,分光光度計(jì)比色杯光徑0.5cm。如果沒有分光光度計(jì),亦可用酶標(biāo)儀檢測(cè),但如果有條件,盡量采用分光光度計(jì)檢測(cè)。蒸餾水調(diào)零,讀取各管吸光度值。一般應(yīng)數(shù)小時(shí)內(nèi)檢測(cè)完畢。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來(lái)不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買說(shuō)明!
產(chǎn)品名稱:FKHR (Ab-256) Antibody
規(guī)格:詳見說(shuō)明
測(cè)試方法:詳見說(shuō)明
客戶自備儀器和試劑:
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點(diǎn):
1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案,1小時(shí)即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測(cè)果糖所需的全套試劑
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過(guò)濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測(cè)試盒說(shuō)明書過(guò)過(guò)濾)。
4 ). 果糖含量測(cè)試盒說(shuō)明書過(guò)加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
人抗紅細(xì)胞抗體RBC(Human anti-red cell antibody) ELISA Kit 96T
腎上腺髓質(zhì)素(22-42)ADM (Adrenomedullin)(22-42) 0.5mg
蛋白質(zhì)磷酸酶-2A(抗原)PP-2A (protein phosphatase 2A) 0.5mg
髓鞘相關(guān)糖蛋白(抗原)MAG (Myelin associated glycoprotein; L-MAG;MAG-a ) 0.5mg
人B細(xì)胞生長(zhǎng)因子BCGF(Human B cell growth protein) ELISA Kit 96T
外周苯二氮受體抗體英文名稱:PBR 0.1ml
大鼠絨毛膜促性腺 CG ELISA Kit 96T
人血紅蛋白CHbC(Human Hemoglobin C) ELISA Kit 96T
AHNAK核蛋白2抗體英文名稱:AHNAK2 0.2ml 胃動(dòng)蛋白2(GKN2)ELISA試劑盒 GKN2 ELISA Kit
凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白11抗體英文名稱:CARD11 0.2ml 人抗磷脂酰絲氨酸抗體(APSA)ELISA試劑盒 APSA ELISA Kit
富含亮氨酸軟骨蛋白抗體英文名稱:CHAD 0.1ml α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISA試劑盒 α2-AP ELISA Kit
8號(hào)染色體開放閱讀框74抗體英文名稱:C8orf74 0.2ml 整合素α5(ITGα5)ELISA試劑盒 ITGα5 ELISA Kit
朊蛋白DPL抗體英文名稱:Doppel 0.2ml 銅離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶β肽(ATP7β)ELISA試劑盒 ATP7β ELISA Kit
球蛋白E受體Fc ε RIγ抗體英文名稱:FCER1G 0.2ml 末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(DNTT)ELISA試劑盒 DNTT ELISA Kit
轉(zhuǎn)錄因子LMCD1抗體英文名稱:LMCD1 0.2ml ADP核糖轉(zhuǎn)移酶5(ART5)ELISA試劑盒 ART5 ELISA Kit
鉀離子通道蛋白家族成員4抗體英文名稱:KCNE4 0.2ml N-乙酰轉(zhuǎn)移酶10(NAT10)ELISA試劑盒 NAT10 ELISA Kit
FKHR (Ab-256) Antibody沙保氏葡萄糖瓊脂 (CM0041) Oxoid 脫氧膽酸鈉5g
m-HPC Agar 膽酸鈉5g
Phenol-re broth( base) 酚紅肉湯(六亞) 1.10987.0500MERCK默克 十二烷基磺酸鈉100g
Legionella CYE agar basis 軍團(tuán)桿CYE瓊脂基礎(chǔ) 1.10242.0001MERCK默克 去垢劑去除樹脂10mL
沙氏BHI瓊脂 250(g) 十二烷基磺酸鈉劑25mL
卵磷脂吐溫80營(yíng)養(yǎng)瓊脂 1000(g) β- 巰基乙醇,蛋白級(jí)10mL
孟加拉紅(虎紅)培養(yǎng)基 1000(g) DTT,蛋白級(jí)5g
酪胨-卵磷脂-吐溫20液體培養(yǎng)基基礎(chǔ) 250(g) DTT,免稱量蛋白級(jí)48 管
血瓊脂基礎(chǔ) (CM0055) Oxoid TCEP 溶液,0.5M5mL
脒多粘素B瓊脂基礎(chǔ) 250用于炭疽桿的培養(yǎng)及初步鑒定 TCEP 鹽酸膦1g
沙門氏+顯色培養(yǎng)基 可以檢測(cè)包括乳糖陽(yáng)性的沙門氏1000ml 鹽酸胍溶液,8M200mL
亮綠膽鹽肉湯 標(biāo)準(zhǔn)方法培養(yǎng)基用于水和食品中大腸群的確認(rèn)和完全測(cè)試500g 咪唑溶液,2M100mL
Rogosa agar Lactobacillus selective agar Rogosa瓊脂/乳酸選擇瓊脂 1.05413.0500MERCK默克 咪唑25g
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