操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測(cè)定過氧化氫的實(shí)際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準(zhǔn)備樣品:
a,細(xì)胞或組織樣品:取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進(jìn)行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細(xì)胞裂解液,如果有必要需進(jìn)行適當(dāng)勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測(cè)。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測(cè)定,尿液通常也可以直接用于測(cè)定,-70℃凍存,用于CAT的檢測(cè)。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi),顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進(jìn)行CAT檢測(cè)。
d,血液中的紅細(xì)胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預(yù)冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒測(cè)定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計(jì)算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)的CAT含量。
3、 CAT檢測(cè):按照下表設(shè)置空白管、自身對(duì)照管、測(cè)定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。樣品的檢測(cè)能設(shè)置平行孔。
4、分光光度計(jì)檢測(cè)405nm處吸光度,分光光度計(jì)比色杯光徑0.5cm。如果沒有分光光度計(jì),亦可用酶標(biāo)儀檢測(cè),但如果有條件,盡量采用分光光度計(jì)檢測(cè)。蒸餾水調(diào)零,讀取各管吸光度值。一般應(yīng)數(shù)小時(shí)內(nèi)檢測(cè)完畢。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買說明!
產(chǎn)品名稱:ASK1 (Ab-83) Antibody
規(guī)格:詳見說明
測(cè)試方法:詳見說明
客戶自備儀器和試劑:
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點(diǎn):
1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案,1小時(shí)即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測(cè)果糖所需的全套試劑
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測(cè)試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測(cè)試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
轉(zhuǎn)錄因子3抗體(螺旋環(huán)螺旋蛋白HE47)英文名稱:TCF3 0.2ml
磷酸化蛋白激酶C抗體 PKC ε英文名稱:phospho-PKC Epsilon??Ser729) 0.1ml
絲氨酸蛋白酶抑制劑B12抗體英文名稱:SERPINB12 0.2ml
Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗牛IgGMouse Anti-Bov IgG/Cy5.5 0.1ml
癌相關(guān)抗原抗原CA15-3 peptide 0.2mg
hypothetical protein 抗原h(huán)ypothetical protein (LOC55652) 0.5mg
緊密連接蛋白3抗體英文名稱:Claudin 3 0.1ml 果糖胺(FRA)ELISA試劑盒 FRA ELISA Kit
小鼠水通道蛋白5AQP-5(Mouse Aquaporin 5) ELISA Kit 96T
大鼠遲現(xiàn)抗原VLA ELISA Kit 96T
人神經(jīng)保護(hù)肽HN ELISA試劑盒Humanin ELISA Kit muman 96T
抗** 1A抗體英文名稱:AVPR1A 0.2ml 細(xì)胞角蛋白20(CK-20)ELISA試劑盒 CK-20 ELISA Kit
羅丹明標(biāo)記的兔抗狗IgGRabbit Anti-dog IgG/RBITC 0.3ml
CD13氨肽酶N抗體英文名稱:CD13 0.1ml 變腎上腺素(MN)ELISA試劑盒 MN ELISA Kit
6號(hào)染色體開放閱讀框165抗體英文名稱:C6orf165 0.2ml 脂生蛋白(ADIG)ELISA試劑盒 ADIG ELISA Kit
延伸突觸蛋白1抗體英文名稱:ESYT1 0.2ml 殺傷細(xì)胞凝集素樣受體亞家族A成員1(KLRA1)ELISA試劑盒 KLRA1 ELISA Kit
FBXL12蛋白抗體英文名稱:FbxL12 0.2ml 腦指蛋白(BFP)ELISA試劑盒 BFP ELISA Kit
ASK1 (Ab-83) AntibodyMFC培養(yǎng)基 250(g) 落 PCR 試劑盒 2.050 次
乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基 1000(g) IPTG 干粉2.5g
無鹽麥康凱瓊脂 (CM0007b) Oxoid IPTG 溶液,200mg/mL1.5mL
加強(qiáng)梭狀芽孢桿培養(yǎng)基 (RCM) (semi-solid) (CM0149) Oxoid X-Gal 干粉0.5g
D/E (Dey/Engley) Neutralizing Agar X-Gal 溶液,20mg/mL10mL
VJ Agar Vogel-Johnson 免質(zhì)粒提取篩選試劑盒1000 次
MRSA顯色培養(yǎng)基 用于耐甲氧西林金黃色葡萄球的分離和鑒定1000ml 可溶性兩性霉素 B 溶液 ,20mg/mL1mL
3%氯化鈉堿性蛋白胨水(APW) 250(g) 氨芐青霉素溶液 ,50mg/mL10mL
VRE顯色培養(yǎng)基 用于耐萬古霉素腸球的分離及鑒定1000ml 桿肽溶液 ,100mg/mL1mL
蛋白胨水 (Andrade) Oxoid 氨芐青霉素干粉1g
擬桿選擇性培養(yǎng)基基礎(chǔ)(改良GAM瓊脂基礎(chǔ)) 250(g) 博萊霉素溶液 ,10mg/mL1mL
察氏培養(yǎng)基 250(g) 羧芐青霉素鈉溶液 ,50mg/mL1mL
卡那霉素七葉甙疊氮瓊脂基礎(chǔ)(CM0591) Oxoid 噻孢霉素溶液 ,100mg/mL1mL
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