操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測(cè)定過氧化氫的實(shí)際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準(zhǔn)備樣品:
a,細(xì)胞或組織樣品:取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進(jìn)行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細(xì)胞裂解液,如果有必要需進(jìn)行適當(dāng)勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測(cè)。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測(cè)定,尿液通常也可以直接用于測(cè)定,-70℃凍存,用于CAT的檢測(cè)。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi),顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進(jìn)行CAT檢測(cè)。
d,血液中的紅細(xì)胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預(yù)冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒測(cè)定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計(jì)算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)的CAT含量。
3、 CAT檢測(cè):按照下表設(shè)置空白管、自身對(duì)照管、測(cè)定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。樣品的檢測(cè)能設(shè)置平行孔。
4、分光光度計(jì)檢測(cè)405nm處吸光度,分光光度計(jì)比色杯光徑0.5cm。如果沒有分光光度計(jì),亦可用酶標(biāo)儀檢測(cè),但如果有條件,盡量采用分光光度計(jì)檢測(cè)。蒸餾水調(diào)零,讀取各管吸光度值。一般應(yīng)數(shù)小時(shí)內(nèi)檢測(cè)完畢。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱:Tau (Ab-205) Antibody
規(guī)格:詳見說明
測(cè)試方法:詳見說明
客戶自備儀器和試劑:
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點(diǎn):
1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案,1小時(shí)即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測(cè)果糖所需的全套試劑
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測(cè)試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測(cè)試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
干擾素誘導(dǎo)蛋白44樣蛋白抗體英文名稱:IFI44L 0.2ml 半乳糖-3-O-磺基轉(zhuǎn)移酶3(GAL3ST3)ELISA試劑盒 GAL3ST3 ELISA Kit
跨膜蛋白TMEM176B抗體英文名稱:LR8 0.2ml Bcl2關(guān)聯(lián)永生基因3(BAG3)ELISA試劑盒 BAG3 ELISA Kit
突觸細(xì)胞粘附分子3抗體英文名稱:Neuroligin 3 0.2ml
磷脂爬行酶3抗體英文名稱:PLSCR3 0.2ml
內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶2抗原ECE2(Endothelin Converting Enzyme 2) 0.5mg
壞死因子配體超家族成員14抗體英文名稱:TNFSF14 0.1ml
紡錘體組裝異常蛋白6抗體英文名稱:SASS6 0.2ml
Cy5.5標(biāo)記的兔抗小鼠IgGRabbit Anti-mouse IgG/Cy5.5 0.1ml
庚型肝炎病毒(抗原)HGV(Hepatitis G vivus) 0.5mg
血管內(nèi)皮生長因子C型抗原VEGF-C(Vascuoar endothelial growth factor-C) 0.5mg
魚類白介素1βIL-1 Beta ELISA Kit 96T
人H-rasHuman H-ras ELISA Kit 96T
人脊髓灰質(zhì)炎病毒IgGPV-IgG(Human Poliomyelitis Virus) ELISA Kit 96T
磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子2抗體英文名稱:Phospho-Stat2 (Tyr690) 0.1ml
前梯度同源蛋白2抗體英文名稱:Anterior Gradient 2 0.1ml 新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒 NN-T4 ELISA Kit
磷酸化酪氨酸蛋白激酶6/激酶抗體英文名稱:phospho-Brk (Tyr447) 0.1ml 可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒 sEPCR ELISA Kit
Tau (Ab-205) Antibody列文EMB 瓊脂/伊紅亞甲藍(lán)乳糖瓊脂 TdT 加尾法 DNA 生物素標(biāo)記試劑盒5次
檢定培養(yǎng)基5號(hào) 250(g) 填入法 DNA 末端標(biāo)記試劑盒 A5次
七葉苷培養(yǎng)基 10(g) 填入法 DNA 末端標(biāo)記試劑盒 B5次
酵母粉瓊脂 250(g) 填入法 DNA 末端標(biāo)記試劑盒 C5次
MSRV medium( base) modified MSRV改性培養(yǎng)基(基礎(chǔ)) 1.09878.0500MERCK默克 DNA 5’末端標(biāo)記試劑盒10 次
MH 肉湯(MHB) 250用于敏感試驗(yàn) dNTP 溶液 ( 標(biāo)記專用 )0.5mL
改良馬丁液體培養(yǎng)基 250(g) 生物素標(biāo)記 dUTP 溶液50μL
DMEM(低糖),干粉 含1000mg/l葡萄糖,L-谷氨酰胺,
110mg/l酸鈉,不含碳酸氫鈉31600-034 Aminoally-dUTP 溶液,10mM100μL
OGYE Agar Oxytetracycline-Glucose-Yeast Ectract Agar Base 1.05978.0500MERCK默克 Cy3-dCTP 溶液,10mM25μL
蛋白胨 具有很高的蛋白胨和氨基酸含量,非常適合細(xì)的生長500g Fluorescein-12-dUTP 溶液,1mM25μL
GN enrichment broth acc.to HAJUNA GN富集肉湯 1.10756.0500MERCK默克 Cy5-dCTP 溶液,10mM25μL
DRBC培養(yǎng)基 250(g) 柱式探針純化試劑盒10 次
V-P半固體瓊脂 250(g) Sephadex G50 介質(zhì)10mL
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