樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過(guò)濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測(cè)試盒說(shuō)明書過(guò)過(guò)濾)。
4 ). 果糖含量測(cè)試盒說(shuō)明書過(guò)加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來(lái)不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買說(shuō)明!
產(chǎn)品名稱:Estrogen Receptor-α (Ab-106) Antibody
規(guī)格:詳見(jiàn)說(shuō)明
測(cè)試方法:詳見(jiàn)說(shuō)明
客戶自備儀器和試劑:
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點(diǎn):
1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案,1小時(shí)即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測(cè)果糖所需的全套試劑
常見(jiàn)樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前,要打開(kāi)酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過(guò) 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測(cè)定過(guò)氧化氫的實(shí)際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準(zhǔn)備樣品:
a,細(xì)胞或組織樣品:取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進(jìn)行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細(xì)胞裂解液,如果有必要需進(jìn)行適當(dāng)勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測(cè)。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測(cè)定,尿液通常也可以直接用于測(cè)定,-70℃凍存,用于CAT的檢測(cè)。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi),顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進(jìn)行CAT檢測(cè)。
d,血液中的紅細(xì)胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預(yù)冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒測(cè)定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計(jì)算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)的CAT含量。
3、 CAT檢測(cè):按照下表設(shè)置空白管、自身對(duì)照管、測(cè)定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過(guò)高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。樣品的檢測(cè)能設(shè)置平行孔。
4、分光光度計(jì)檢測(cè)405nm處吸光度,分光光度計(jì)比色杯光徑0.5cm。如果沒(méi)有分光光度計(jì),亦可用酶標(biāo)儀檢測(cè),但如果有條件,盡量采用分光光度計(jì)檢測(cè)。蒸餾水調(diào)零,讀取各管吸光度值。一般應(yīng)數(shù)小時(shí)內(nèi)檢測(cè)完畢。
血管??皮生長(zhǎng)因子受體2抗體英文名稱:VEGFR2 0.1ml
S100A9抗體英文名稱:S100-A9 0.1ml
磷酸化KB抑制蛋白激酶β抗體英文名稱:phospho-IKK beta(Tyr199) 0.1ml 白介素1δ(FIL1δ)ELISA試劑盒 FIL1δ ELISA Kit
ELAVL1/HuR多肽抗原ELAVL1/HuR peptide 0.5mg
鏈霉親和素Streptavidin, SA 1mg
小鼠乙型肝炎表面抗體HBsAb(Mouse hepatitis B virus surface antibody) ELISA Kit 96T
大鼠GATA結(jié)合蛋白4GATA4 ELISA Kit 96T
細(xì)胞色素P450 1A1抗體英文名稱:CYP1A1/AHRR 0.1ml 白細(xì)胞介素4(IL-4)ELISA試劑盒 IL-4 ELISA Kit
人高遷移率族蛋白B1Human High mobility group protein B1,HMGB-1 ELISA Kit 96T
含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族7抗體英文名稱:ASB7 0.2ml 神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(NT-3)ELISA試劑盒 NT-3 ELISA Kit
間隙連接蛋白45抗體英文名稱:Connexin-45 0.1ml 肌酸激酶同工酶BB(CK-BB)ELISA試劑盒 CK-BB ELISA Kit
重組增強(qiáng)型綠色熒光蛋白抗體英文名稱:EGFP 0.1ml 嗜中性粒細(xì)胞胞漿因子4(NCF4)ELISA試劑盒 NCF4 ELISA Kit
過(guò)敏C5a/補(bǔ)體C5a抗體英文名稱:C5a anaphylatoxin 0.1ml 巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶5(FUT5)ELISA試劑盒 FUT5 ELISA Kit
磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體英文名稱:Phospho-EGFR(Tyr845) 0.1ml 雙特異性酪氨酸磷酸化調(diào)節(jié)激酶1A(DYRK1A)ELISA試劑盒 DYRK1A ELISA Kit
生長(zhǎng)分化因子7抗體英文名稱:GDF7 0.2ml 人抗雙鏈DNA抗體(Anti-dsDNA)ELISA試劑盒 Anti-dsDNA ELISA Kit
轉(zhuǎn)化蛋白p21抗體(原癌基因H-ras抗體)英文名稱:HRAS+KRAS 0.2ml 弗林蛋白酶(FUR)ELISA試劑盒 FUR ELISA Kit
Estrogen Receptor-α (Ab-106) Antibody沙保氏液體培養(yǎng)基 (CM0147) Oxoid 一站式磁珠法全血 mRNA 提取試劑盒50 次
D/E中和瓊脂 能中和抗微生物的化學(xué)試劑,用于環(huán)境標(biāo)本中檢測(cè)和計(jì)數(shù)表面微生物500g 一站式植物 mRNAout25 次
VJ瓊脂 分離樣品中凝固酶陽(yáng)性、甘露醇發(fā)酵的金黃色葡萄球菌500g 一站式磁珠法植物 mRNAout50 次
Legionella BCYE alpha-growth supplement 軍團(tuán)桿菌CYEa-生長(zhǎng)添加劑 1.10240.0001MERCK默克 一站式** mRNAout25 次
Membrane-fiter Enterococcus selective agar acc.to SLANETZ and BARTLEY(base) 膜過(guò)濾腸球菌選擇瓊脂(基礎(chǔ)) 1.05289.0500MERCK默克 一站式磁珠法** mRNA 提取試劑盒50 次
乙酰胺瓊脂 250(g) mRNA 提取試劑盒25 次
堿性蛋白胨水(APW) 250(g) 磁珠法 mRNA 提取試劑盒25 次
腸球菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)(疊氮鈉-結(jié)晶紫-七葉苷瓊脂) 250(g) Oligo(dT) 纖維素25mg
BiGGY 瓊脂 (Nickerson 培養(yǎng)基) (CM0589) Oxoid 鏈霉親和素磁珠2mL
酪蛋白瓊脂 250(g) Oligo(dT) 再生溶液100mL
沙門氏+菌顯色培養(yǎng)基 可以檢測(cè)包括乳糖陽(yáng)性的沙門氏菌1000ml 固相 RNase **劑100mL
Baird-Parker瓊脂基礎(chǔ) 與卵黃亞碲酸鹽增菌液合用,用于金黃色葡萄球菌選擇性培養(yǎng)500g 固相 RNase **劑250mL
Ropse-Bengal Chloramphenicol Agar羅斯-孟加拉氯霉素瓊脂 1.00467.0500MERCK默克 氣相 RNase **劑120mL
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