操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測定過氧化氫的實際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準(zhǔn)備樣品:
a,細(xì)胞或組織樣品:取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細(xì)胞裂解液,如果有必要需進行適當(dāng)勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測定,尿液通常也可以直接用于測定,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi),顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進行CAT檢測。
d,血液中的紅細(xì)胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預(yù)冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)的CAT含量。
3、 CAT檢測:按照下表設(shè)置空白管、自身對照管、測定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進行測定。樣品的檢測能設(shè)置平行孔。
4、分光光度計檢測405nm處吸光度,分光光度計比色杯光徑0.5cm。如果沒有分光光度計,亦可用酶標(biāo)儀檢測,但如果有條件,盡量采用分光光度計檢測。蒸餾水調(diào)零,讀取各管吸光度值。一般應(yīng)數(shù)小時內(nèi)檢測完畢。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細(xì)閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱:NFκB-p105/p50 (Ab-337) Antibody
規(guī)格:詳見說明
測試方法:詳見說明
客戶自備儀器和試劑:
紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點:
1、優(yōu)化設(shè)計的實驗方案,1小時即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
實驗通用規(guī)則:
1、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
7、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時,每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
人胎盤生長因子(多肽抗原)PLGF (Placenta growth factor fragment)(human) 0.5mg
絲裂原活化蛋白激酶p38(抗原)p38 MAPK/MKK3/MAPKK14 0.5mg
大鼠骨堿性磷酸酶BALP ELISA Kit 96T
發(fā)育多能性相關(guān)蛋白3抗體英文名稱:Stella 0.2ml
人糖蛋白130gp130(Human glucoprotein 130) ELISA KIT 96T
人血小板相關(guān) 球蛋白PAIg(Human platelet-associated immunoglobulins) ELISA Kit 96T
磷酸化蛋白激酶B抗體英文名稱:phospho-AKT (Ser473) 0.1ml 胃泌素釋放多肽(GRP)ELISA試劑盒 GRP ELISA Kit
異染色體同源蛋白1抗體英文名稱:CBX1 0.2ml 人抗腦組織抗體(ABAb)ELISA試劑盒 ABAb ELISA Kit
微管結(jié)合蛋白CYLD抗體英文名稱:CYLD 0.1ml 嗅素3(OLFM3)ELISA試劑盒 OLFM3 ELISA Kit
9號染色體開放閱讀框3抗體英文名稱:C9orf3 0.2ml 整合素α9(ITGα9)ELISA試劑盒 ITGα9 ELISA Kit
對接蛋白4抗體英文名稱:DOK4 0.2ml 酮戊二酸脫氫酶(OGDH)ELISA試劑盒 OGDH ELISA Kit
磷酸化細(xì)絲蛋白A抗體英文名稱:phospho-Filamin A (Ser1458) 0.1ml 母系蛋白3(MATN3)ELISA試劑盒 MATN3 ELISA Kit
胰高血糖素受體抗體英文名稱:Glucagon Receptor 0.1ml 光導(dǎo)蛋白(PDC)ELISA試劑盒 PDC ELISA Kit
人促腎上皮質(zhì) 釋放 human corticotropin releasing hormone,CRH ELISA Kit 96T
賴氨酰氧化酶相關(guān)蛋白2抗體英文名稱:LOXL2 0.2ml APEX核酸酶1(APEX1)ELISA試劑盒 APEX1 ELISA Kit
轉(zhuǎn)移抑制基因抗體英文名稱:Nm23 0.1ml
NFκB-p105/p50 (Ab-337) AntibodyESBL顯色培養(yǎng)基 用于產(chǎn)超廣譜β內(nèi)酰胺酶(ESBL)的耐藥菌株的分離和鑒定,同時抑制帶有ampC抗性**的生長1000ml 斯氏李斯特氏菌 凍干粉
紫紅膽汁瓊脂 選擇分離乳制品和食品中大腸桿菌500g 側(cè)孢短芽孢桿菌 凍干粉
THAYER-MARTIN添加劑1/奈瑟氏菌選擇培養(yǎng)添加劑1(抑制劑) 乳酸乳球菌乳亞種 凍干粉
Brain-heart agar 腦心瓊脂 1.13825.0500MERCK默克 戊糖片球菌 凍干粉
大腸桿菌顯色培養(yǎng)基(ECA) 1000mL/瓶 Chryseobacterium jeonii 凍干粉
我妻氏培養(yǎng)基基礎(chǔ) 250(g) 菩提奇異球菌 凍干粉
Calcium caseinate agar acc.to FRAZIER and RUPP,modified 1.05409.0500MERCK默克 拜氏梭菌 凍干粉
DRBC培養(yǎng)基 250(g) 干燥棒桿菌 凍干粉
WORT瓊脂基礎(chǔ) 250(g) 屎腸球菌(屎鏈球菌) 凍干粉
Hektoen enteric agar Hektoen 腸瓊脂 1.11681.0500MERCK默克 糞腸球菌(糞鏈球菌) 凍干粉
Bacto? Peptone 牙齦卟啉單胞菌 凍干粉
Columbia Blood Agar Base 具核梭桿菌多形亞種 凍干粉
GSP agar Paeudomonas Aeromonas selective agar acc.to KIEL WEIN( base) 過氧化苯甲酰酚紅瓊脂/假單胞菌氣單胞菌選擇瓊脂(基礎(chǔ)) 1.10230.0500MERCK默克 脆弱擬桿菌 凍干粉
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