樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細(xì)閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱:GSK3β (Ab-9) Antibody
規(guī)格:詳見說明
測試方法:詳見說明
客戶自備儀器和試劑:
紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點:
1、優(yōu)化設(shè)計的實驗方案,1小時即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
實驗通用規(guī)則:
1、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
7、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時,每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測定過氧化氫的實際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準(zhǔn)備樣品:
a,細(xì)胞或組織樣品:取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細(xì)胞裂解液,如果有必要需進行適當(dāng)勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測定,尿液通常也可以直接用于測定,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi),顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進行CAT檢測。
d,血液中的紅細(xì)胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預(yù)冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)的CAT含量。
3、 CAT檢測:按照下表設(shè)置空白管、自身對照管、測定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進行測定。樣品的檢測能設(shè)置平行孔。
4、分光光度計檢測405nm處吸光度,分光光度計比色杯光徑0.5cm。如果沒有分光光度計,亦可用酶標(biāo)儀檢測,但如果有條件,盡量采用分光光度計檢測。蒸餾水調(diào)零,讀取各管吸光度值。一般應(yīng)數(shù)小時內(nèi)檢測??畢。
1號染色體開放閱讀框69抗體英文名稱:C1orf69 0.2ml β淀粉樣多肽42(ABeta 42)ELISA試劑盒 ABeta 42 ELISA Kit
磷酸化CBX5抗體英文名稱:Phospho-CBX5 (Tyr37) 0.2ml 嗅素1(OLFM1)ELISA試劑盒 OLFM1 ELISA Kit
雌 受體α抗體英文名稱:Estrogen Receptor alpha 0.1ml 髓分化因子88(MyD88)ELISA試劑盒 MyD88 ELISA Kit
RAS家族關(guān)聯(lián)結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體英文名稱:RASSF7 0.2ml
血紅素氧合酶 1/熱休克蛋白32抗體英文名稱:Heme Oxygenase 1 0.1ml 肝素酶(HPA)ELISA試劑盒 HPA ELISA Kit
乙酰乳酸合成酶蛋白抗體英文名稱:ILVBL 0.2ml β細(xì)胞素(βTC)ELISA試劑盒 βTC ELISA Kit
MITF相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體英文名稱:MITF 0.2ml
磷酸化2型神經(jīng)纖維瘤抗體英文名稱:Phospho-NF2(Ser518) 0.1ml
N-乙酰半乳糖胺糖蛋白3、β-半乳糖轉(zhuǎn)移酶1抗體英文名稱:C1GALT1 0.2ml N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒 NAG ELISA Kit
src原癌基因抗體英文名稱:SRC 0.2ml
原肌球蛋白抗體英文名稱:Trop-2 0.1ml
14-3-3τ蛋白抗體英文名稱:14-3-3 Tau 0.1ml
PE-Cy3標(biāo)記的兔抗牛IgGRabbit Anti-Bov IgG/PE-Cy3 0.1ml
睪 受體相關(guān)蛋白TRA16 0.5mg
蛋白磷酸酶4(抗原)PP2Ac 0.5mg
人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子BVEGF-B(Human Vascular Endothelial cell Growth Factor B) ELISA KIT 96T
GSK3β (Ab-9) AntibodySalmonella enrichment broth acc.to RAPPAPORT-VASSILIADIS( RVS) 1.07700.0500MERCK默克 蠟狀芽孢桿菌 凍干粉
MacCONKEY agar 麥康凱瓊脂 1.05465.0500MERCK默克 光滑假絲酵母 凍干粉
李斯特氏菌顯色培養(yǎng)菌(LA) 1000mL/瓶 羅倫隱球酵母 凍干粉
玫瑰紅鈉瓊脂 1000(g) Yarrowia lipolytica 凍干粉
Campy-Cefex瓊脂基礎(chǔ) 100(g) Pseudozyma antarctica 凍干粉
麥康凱肌醇阿東醇羧芐青霉素瓊脂基礎(chǔ)(MIAC) 100(g) 新生隱球菌 凍干粉
肌醇測定培養(yǎng)基 250用于嬰幼兒配方食品和乳粉中肌醇測定 季也蒙*** 凍干粉
西紅柿汁瓊脂 (CM0113) Oxoid 解脂復(fù)膜孢酵母(亞羅解脂酵母) 凍干粉
Sabouraud Dextrose Broth 纖維堆囊菌 凍干粉
Peptone Bacteriological Neutralised 中性**學(xué)蛋白胨 Oxoid500g 解脂復(fù)膜孢酵母(亞羅解脂酵) 凍干粉
SSDC agar(Salmonella-Shigella agar with sodium dexoycholate and calcium chloride) SSDC 瓊脂/沙門氏菌-志賀氏菌瓊脂(含脫氧膽鹽氯化鈣) 1.16724.0500MERCK默克 白色假絲酵母(白色***) 凍干粉
酪蛋白胨大豆胨瓊脂USP(TSB) 埃切畢赤酵母 凍干粉
亮綠酚紅乳糖瓊脂 東方伊薩酵母 凍干粉
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