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產(chǎn)品名稱:Cdc25B (Phospho-Ser149) Antibody
規(guī)格:詳見說(shuō)明
測(cè)試方法:詳見說(shuō)明
客戶自備儀器和試劑:
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點(diǎn):
1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案,1小時(shí)即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測(cè)果糖所需的全套試劑
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過(guò)濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測(cè)試盒說(shuō)明書過(guò)過(guò)濾)。
4 ). 果糖含量測(cè)試盒說(shuō)明書過(guò)加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
富半胱氨酸肝素結(jié)合蛋白61抗體英文名稱:CCN1 0.1ml 粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GMCSF/CSF2)ELISA試劑盒 GMCSF/CSF2 ELISA Kit
軸絲動(dòng)力蛋白7抗體英文名稱:DNAH7 0.2ml 細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子3(SOCS3)ELISA試劑盒 SOCS3 ELISA Kit
人布魯氏 抗體IgGBrucella Ab IgG(Human Brucella Antibody IgG) ELISA Kit 96T
p21激活激酶4抗體英文名稱:PAK4 0.1ml
磷酸鞘氨醇裂解酶1抗體英文名稱:SGPL1 0.1ml
01群小川型霍亂弧 抗體英文名稱:V.cholera Ogawa 0.2ml
6-磷酸山梨醇脫氫酶抗體英文名稱:S6PDH 0.2ml
活化白細(xì)胞粘附分子抗原CD166/ALCAM(activated leukocyte celladhesion molecule) 0.5mg
人可溶性腺苷酸環(huán)化酶sAC(Human Soluble Adenylate Cyclase) ELISA Kit 96T
α1酸性糖蛋白2抗體(類粘蛋白2)英文名稱:Alpha 1 acid glycoprotein 2 0.2ml 微管多特異性有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(ABCC2)ELISA試劑盒 ABCC2 ELISA Kit
轉(zhuǎn)錄因子MYB相關(guān)蛋白B抗體英文名稱:B MyB 0.2ml 皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA試劑盒 Cortisol ELISA Kit
磷酸化δ連環(huán)蛋白抗體英文名???:phospho-delta 1 Catenin (Thr916) 0.1ml 甘油三酯(TG)ELISA試劑盒 TG ELISA Kit
分泌和跨膜蛋白1抗體英文名稱:SECTM1 0.1ml
低分子量蛋白酶體7抗體英文名稱:LMP7 0.2ml Anoctamin3蛋白(ANO3)ELISA試劑盒 ANO3 ELISA Kit
非霍奇金瘤重復(fù)蛋白3抗體英文名稱:NHLRC3 0.2ml
磷脂酰肌醇激酶3催化亞單位3抗體英文名稱:PI 3 Kinase Class 3 0.1ml
Cdc25B (Phospho-Ser149) Antibody改良O157顯色培養(yǎng)基A 1000 mL/瓶 Patulibacter minatonensis 凍干粉
氯化鈉多粘菌素B肉湯基礎(chǔ)(SCPB) 250(g) Patulibacter medicamentivorans 凍干粉
胰胨大豆瓊脂斜面(含3% NaCl) 250(g) Patulibacter americanus 凍干粉
西蒙氏枸櫞酸鹽瓊脂 250(g) 斯氏普羅威登斯菌 凍干粉
艱難梭菌瓊脂基礎(chǔ) (CM0601) Oxoid 心桿菌 凍干粉
過(guò)敏測(cè)試診斷瓊脂 (D.S.T.A.) (CM0261) Oxoid 溶血孿生球菌 凍干粉
1%亞碲酸鹽溶液 用于金黃色葡萄球菌選擇性培養(yǎng)時(shí)的添加劑20mL 鉛黃腸球菌 凍干粉
Oxford Medium Base 溶血隱秘桿菌 凍干粉
Dichloran GlycerolAgar (DG18) Dichloran 甘油瓊脂(DG18) 1.00445.0500MERCK默克 頭葡萄球菌頭亞種 凍干粉
李斯特氏菌選擇富集添加劑 豬丹毒絲菌 凍干粉
***檢定培養(yǎng)基3號(hào) 250(g) 福賽坦氏菌 凍干粉
霍亂雙糖鐵瓊脂 250(g) 佐久氏沙雷氏菌 凍干粉
葡萄糖胰蛋白胨瓊脂 250(g) 水雷夫松氏菌 凍干粉
操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過(guò) 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測(cè)定過(guò)氧化氫的實(shí)際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準(zhǔn)備樣品:
a,細(xì)胞或組織樣品:取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進(jìn)行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細(xì)胞裂解液,如果有必要需進(jìn)行適當(dāng)勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測(cè)。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測(cè)定,尿液通常也可以直接用于測(cè)定,-70℃凍存,用于CAT的檢測(cè)。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi),顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進(jìn)行CAT檢測(cè)。
d,血液中的紅細(xì)胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預(yù)冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒測(cè)定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計(jì)算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)的CAT含量。
3、 CAT檢測(cè):按照下表設(shè)置空白管、自身對(duì)照管、測(cè)定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過(guò)高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。樣品的檢測(cè)能設(shè)置平行孔。
4、分光光度計(jì)檢測(cè)405nm處吸光度,分光光度計(jì)比色杯光徑0.5cm。如果沒有分光光度計(jì),亦可用酶標(biāo)儀檢測(cè),但如果有條件,盡量采用分光光度計(jì)檢測(cè)。蒸餾水調(diào)零,讀取各管吸光度值。一般應(yīng)數(shù)小時(shí)內(nèi)檢測(cè)完畢。
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