操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過(guò) 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測(cè)定過(guò)氧化氫的實(shí)際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準(zhǔn)備樣品:
a,細(xì)胞或組織樣品:取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進(jìn)行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細(xì)胞裂解液,如果有必要需進(jìn)行適當(dāng)勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測(cè)。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測(cè)定,尿液通常也可以直接用于測(cè)定,-70℃凍存,用于CAT的檢測(cè)。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi),顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進(jìn)行CAT檢測(cè)。
d,血液中的紅細(xì)胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預(yù)冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒測(cè)定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計(jì)算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)的CAT含量。
3、 CAT檢測(cè):按照下表設(shè)置空白管、自身對(duì)照管、測(cè)定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過(guò)高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。樣品的檢測(cè)能設(shè)置平行孔。
4、分光光度計(jì)檢測(cè)405nm處吸光度,分光光度計(jì)比色杯光徑0.5cm。如果沒(méi)有分光光度計(jì),亦可用酶標(biāo)儀檢測(cè),但如果有條件,盡量采用分光光度計(jì)檢測(cè)。蒸餾水調(diào)零,讀取各管吸光度值。一般應(yīng)數(shù)小時(shí)內(nèi)檢測(cè)完畢。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來(lái)不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買(mǎi)說(shuō)明!
產(chǎn)品名稱(chēng):Paxillin (phospho-Tyr88) Antibody
規(guī)格:詳見(jiàn)說(shuō)明
測(cè)試方法:詳見(jiàn)說(shuō)明
客戶自備儀器和試劑:
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點(diǎn):
1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案,1小時(shí)即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測(cè)果糖所需的全套試劑
常見(jiàn)樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱(chēng)取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過(guò)濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)過(guò)過(guò)濾)。
4 ). 果糖含量測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)過(guò)加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前,要打開(kāi)酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
人類(lèi)似RIKEN cDNA 3110050K21 基因Human similar to RIKEN cDNA 3110050K21 gene ELISA Kit 96T
腺苷酸環(huán)化酶1抗體英文名稱(chēng):Adenylate cyclase 1 0.2ml 生長(zhǎng)抑素(SS)ELISA試劑盒 SS ELISA Kit
β-內(nèi)啡肽/β endorphin抗體英文名稱(chēng):beta endorphin 0.1ml 磷酯酶Cγ鏈(PLCγ1)ELISA試劑盒 PLCγ1 ELISA Kit
2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框76抗體英文名稱(chēng):C2orf76 0.2ml 蛋白基因產(chǎn)物9.5(PGP 9.5)ELISA試劑盒 PGP 9.5 ELISA Kit
C-反應(yīng)蛋白抗體英文名稱(chēng):CRP 0.1ml γ干擾素誘導(dǎo)單核細(xì)胞因子(MIG/CXCL9)ELISA試劑盒 MIG/CXCL9 ELISA Kit
腦啡肽A抗體英文名稱(chēng):Dynorphin A 0.2ml 無(wú)翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員3A(WNT3A)ELISA試劑盒 WNT3A ELISA Kit
FLAG Tag標(biāo)簽抗體(N端)英文名稱(chēng):FLAG Tag (NT) 0.1ml 前列腺轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶(TGM4)ELISA試劑盒 TGM4 ELISA Kit
磷酸化GADD153抗體英文名稱(chēng):phospho-GADD153 (Ser30) 0.1ml 肌動(dòng)蛋白束蛋白(FSCN)ELISA試劑盒 FSCN ELISA Kit
極光激酶A相互作用蛋白1抗體英文名稱(chēng):AKIP 0.2ml 細(xì)胞周期蛋白A1(CCNA1)ELISA試劑盒 CCNA1 ELISA Kit
磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶抗體英文名稱(chēng):phospho-LKB1(Ser334) 0.1ml GATA結(jié)合蛋白1(GATA1)ELISA試劑盒 GATA1 ELISA Kit
神經(jīng)細(xì)胞穿透素2抗體英文名稱(chēng):NPTX2 0.2ml
磷酸化蛋白激酶C亞性抗體英文名稱(chēng):Phospho-PRKACB(Thr198) 0.1ml
RAS癌基因家族蛋白R(shí)AB40C抗體英文名稱(chēng):RAB40C 0.2ml
宮頸癌抑癌蛋白5/鋅指蛋白434抗體英文名稱(chēng):ZNF434 0.2ml
鋅指蛋白693抗體英文名稱(chēng):ZNF693 0.2ml
堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記的兔抗牛IgMRabbit Anti-Bovine IgM/AP 0.1ml
Paxillin (phospho-Tyr88) AntibodyOGYE瓊脂/土霉素葡萄糖酵母瓊脂 Bacillus aryabhattai 凍干粉
A-1 Broth A-1肉湯 1.00415.0500MERCK默克 Bacillus pallidus 凍干粉
李斯特氏菌顯色培養(yǎng)菌(LA) 1000mL/瓶 Bacillus amyloliquefaciens 凍干粉
吲哚培養(yǎng)基(又名色氨酸肉湯) 10(g) Bacillus pumilus 凍干粉
改良MC培養(yǎng)基 250(g) Bacillus subtilis 凍干粉
TM培養(yǎng)基 250用于淋球菌的分離培養(yǎng)(Quelab方法) 棲冷克呂沃爾菌 凍干粉
亮綠瓊脂 (Kauffmann 培養(yǎng)基) (CM0263) Oxoid 土生叢毛單胞菌 凍干粉
牛奶瓊脂 (CM0021) Oxoid 鲇愛(ài)德華氏菌 凍干粉
Brilliant Green Agar Corynebacterium guangdongense 凍干粉
Mannitol Salt Agar 馬腸鏈球菌 凍干粉
羅斯-孟加拉氯霉素瓊脂 紅球菌屬 凍干粉
Bacillus cereus selective supplement 蠟狀芽孢桿菌選擇添加劑 1.09875.0001MERCK默克 代爾夫特食酸菌 凍干粉
葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基 250(g) 解鳥(niǎo)氨酸拉烏爾菌 凍干粉
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