樣品制備：
1）. 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品，體積可達(dá)2.000ml。
2）. 過(guò)濾混濁溶液。
3）. 除去樣品中的CO 2 （果糖含量測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)過(guò)過(guò)濾）。
4 ）. 果糖含量測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)過(guò)加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ）. 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。
6 ）. 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品（如有必要調(diào)整PH值至8.0）。
7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。
9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10）.含脂肪的樣品用熱水提取。

【友情提示】：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來(lái)不必要的損失，請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買(mǎi)說(shuō)明！

產(chǎn)品名稱(chēng)：Smad3 (Phospho-Ser425) Antibody
規(guī)格：詳見(jiàn)說(shuō)明
測(cè)試方法：詳見(jiàn)說(shuō)明
客戶自備儀器和試劑：
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點(diǎn)：
       1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案，1小時(shí)即可完成
       2、靈敏度高，操作便捷
       3、試劑盒提供檢測(cè)果糖所需的全套試劑 
常見(jiàn)樣本處理方法：
1、血清（漿）樣品：直接檢測(cè)。
2、組織：按照組織質(zhì)量（g） ：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱(chēng)取約 0.1g組織，
加入 1mL提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則：
1、洗液不夠時(shí)，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒，混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對(duì)皮膚有腐蝕性，應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前，要打開(kāi)酶標(biāo)儀，使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí)，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí)，避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí)，要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板，防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí)，每次洗液加入后，應(yīng)靜置1分鐘，使清洗更加徹底。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí)，倒去液體后，要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快，以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現(xiàn)配。

操作步驟(僅供參考)：  
1.配制65mM H2O2基液：本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過(guò) 氧化氫不是非常穩(wěn)定，使用前需自行測(cè)定過(guò)氧化氫的實(shí)際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍，使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準(zhǔn)備樣品：  
a,細(xì)胞或組織樣品：取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進(jìn)行裂解，可以采用Leagene Western及IP 細(xì)胞裂解液，如果有必要需進(jìn)行適當(dāng)勻漿，低速離心取上清，-70℃凍存，用于CAT的檢測(cè)。  
b,血漿、血清和尿液樣品：血漿、血清按照常規(guī)方法制備，用生理鹽水10倍稀釋后， 可以直接用于本試劑盒的測(cè)定，尿液通常也可以直接用于測(cè)定，-70℃凍存，用于CAT的檢測(cè)。  
c,全血樣品：收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi)，顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次，用CAT Assay buffer1000倍后進(jìn)行CAT檢測(cè)。
d,血液中的紅細(xì)胞裂解液：用抗凝管收集血液，顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min，棄上清，沉淀用預(yù)冷的生理鹽水洗滌3次。  
e,高活性樣品：如果樣品中含有較高活性的CAT，可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒測(cè)定蛋白濃度，以便于后續(xù) 計(jì)算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)的CAT含量。  
3、 CAT檢測(cè)：按照下表設(shè)置空白管、自身對(duì)照管、測(cè)定管，溶液應(yīng)按照順序依次加入，并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過(guò)高，可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。樣品的檢測(cè)能設(shè)置平行孔。
4、分光光度計(jì)檢測(cè)405nm處吸光度，分光光度計(jì)比色杯光徑0.5cm。如果沒(méi)有分光光度計(jì)，亦可用酶標(biāo)儀檢測(cè)，但如果有條件，盡量采用分光光度計(jì)檢測(cè)。蒸餾水調(diào)零，讀取各管吸光度值。一般應(yīng)數(shù)小時(shí)內(nèi)檢測(cè)完畢。
磷酸??細(xì)胞核受體Rev-Erbα抗體英文名稱(chēng)：Phospho-NR1D1(Ser55 + Ser59) 0.1ml  

富含GC啟動(dòng)子結(jié)合蛋白1/血管壁相連蛋白抗體英文名稱(chēng)：GPBP1 0.2ml  核糖核酸酶K(RNASEK)ELISA試劑盒  RNASEK ELISA Kit

轉(zhuǎn)錄因子HES2抗體英文名稱(chēng)：HES2 0.2ml  補(bǔ)體成分1r(C1r)ELISA試劑盒  C1r ELISA Kit

自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體英文名稱(chēng)：LC3B/MAP LC3β/MAP1A 0.1ml  CopineⅨ蛋白(CPNE9)ELISA試劑盒  CPNE9 ELISA Kit

谷氨酸受體2D抗體英文名稱(chēng)：NR2D 0.1ml  

尿激酶型纖溶酶原激活因子受體抗體英文名稱(chēng)：uPA Receptor 0.1ml  

DNA修復(fù)和重組蛋白R(shí)AD54B抗體英文名稱(chēng)：RAD54B 0.2ml  

三碘甲狀腺素T3抗體英文名稱(chēng)：T3 0.1ml  

絲氨酸/蘇氨酸激酶36融合同源蛋白抗體英文名稱(chēng)：STK36 0.2ml  

磷酸化KB抑制蛋白激酶α抗體英文名稱(chēng)：phospho-IKK alpha (Ser176 + Ser180) 0.1ml  白介素23(IL23)ELISA試劑盒  IL23 ELISA Kit

基質(zhì)金屬蛋白酶9MMP9 0.5mg  

磷酸鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗原SLC34A2/NaPi-2b(Solute carrier family 34 member 2) 0.5mg  

人正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子RANTES/CCL5(Human regulated on activation in normal T-cell expressed and secreted) ELISA kit 96T  

人腫瘤特異性移植抗原TSTA(Human tumor specific transplantation antigen) ELISA Kit 96T  

人  素瘤衍生亮氨酸拉鏈額外核因子MLZE(Human melanomaderived leucine zipper extra-nuclear factor) ELISA Kit 96T  

Smad3 (Phospho-Ser425) Antibody

D,L-福莫特羅-D6 (主要的) D,L-Formoterol-D6 (Major) 73573-87-2 (unlabeled) 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

鹽酸芐基肼 Benzylhydrazine hydrochloride 1073-62-7 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

芐基肼 Benzylhydrazine 555-96-4 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

草酸鹽芐基肼 Benzylhydrazine oxalate salt 32064-65-6 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

N-去甲酰-N-芐氧羰基奧利司他 N-Deformyl-N-benzyloxycarbonyl Orlistat 108051-94-1 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

(2S,3R,5S)-5-[(N-甲酰-L-亮氨酰)氧]-2-己基-3-羥基十六烷酸(奧利司他雜質(zhì)) (2S,3R,5S)-5-[(N-Formyl-L-leucyl)oxy]-2-hexyl-3-hydroxyhexadecanoic Acid (Orlistat Impurity) 130793-28-1 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

C17鞘氨醇 C17 Sphingosine 6918-48-5 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

D-赤-鞘氨醇 C-15 D-erythro-Sphingosine C-15 86555-28-4 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

N-十八烷酰二氫-D-赤-鞘氨醇 N-Stearoyldihydro-D-erythro-Sphingosine 2304-80-5 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

Fmoc-3-苯甲酰-赤-鞘氨醇 Fmoc-3-benzoyl-erythro-sphingosine 676485-58-8 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

D-赤-鞘氨醇(硫酸) D-erythro-Sphingosine (sulfate) 56607-20-6 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

D-赤-鞘氨醇-1-磷酸鹽 D-erythro-Sphingosine-1-phosphate 26993-30-6 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

N-十八烷酰-D-鞘氨醇 N-Stearoyl-D-Sphingosine 2304-81-6 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

二氫-D-赤-鞘氨醇 Dihydro-D-erythro-Sphingosine 764-22-7 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

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