樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱:BAD (Phospho-Ser136) Antibody
規(guī)格:詳見說明
測試方法:詳見說明
客戶自備儀器和試劑:
紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點:
1、優(yōu)化設(shè)計的實驗方案,1小時即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
實驗通用規(guī)則:
1、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開酶標儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
7、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時,每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測定過氧化氫的實際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準備樣品:
a,細胞或組織樣品:取恰當細胞或組織進行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細胞裂解液,如果有必要需進行適當勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測定,尿液通常也可以直接用于測定,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi),顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進行CAT檢測。
d,血液中的紅細胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預(yù)冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計算單位蛋白重量組織或細胞內(nèi)的CAT含量。
3、 CAT檢測:按照下表設(shè)置空白管、自身對照管、測定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過高,可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定。樣品的檢測能設(shè)置平行孔。
4、分光光度計檢測405nm處吸光度,分光光度計比色杯光徑0.5cm。如果沒有分光光度計,亦可用酶標儀檢測,但如果有條件,盡量采用分光光度計檢測。蒸餾水調(diào)零,讀取各管吸光度值。一般應(yīng)數(shù)小時內(nèi)檢測完畢。
血藍蛋白KLH (keyhole limpet hemocyanin) 10mg
硫氧環(huán)蛋白還原酶1抗體英文名稱:TXNRD1 0.2ml
跨膜蛋白SEMA4G抗體英文名稱:SEMA4G 0.2ml
膠體金標記的羊抗雞IgGGoat Anti-Chicken IgG/Gold 0.5ml
人表皮生長因子受體-8(多肽片斷抗原)EGFR- V III 0.5mg
同源盒轉(zhuǎn)錄因子LMX1A抗體英文名稱:LMX1A 0.2ml Ⅲ型膠原(COL3)ELISA試劑盒 COL3 ELISA Kit
破傷風抗體(雙抗原夾心法) 96T
小鼠抵抗素Resistin(Mouse Resistin) ELISA Kit 96T
大鼠促腎上腺皮質(zhì) ACTH ELISA Kit 96T
人蛋白SHuman Protein S ELISA Kit 96T
自噬相關(guān)蛋白8A抗體英文名稱:APG8A 0.2ml 血管內(nèi)皮生長因子受體3(VEGFR3/Flt4)ELISA試劑盒 VEGFR3/Flt4 ELISA Kit
嗜乳脂蛋白樣9抗體英文名稱:BTNL9 0.2ml 亮氨酸富含重復(fù)絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶2(LRRK2)ELISA試劑盒 LRRK2 ELISA Kit
1號染色體開放閱讀框149抗體英文名稱:C1orf149 0.2ml 大腸癌專一抗原3(CCSA-3)ELISA試劑盒 CCSA-3 ELISA Kit
COMM結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體英文名稱:COMMD4 0.2ml 原鈣黏素17(PCDH17)ELISA試劑盒 PCDH17 ELISA Kit
生長抑制DNA損傷基因34抗體英文名稱:GADD34 0.1ml 核轉(zhuǎn)錄因子Y亞基γ(NFYC)ELISA試劑盒 NFYC ELISA Kit
FAM家族蛋白40A抗體英文名稱:FAM40A 0.2ml 葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白10(GLUT10)ELISA試劑盒 GLUT10 ELISA Kit
BAD (Phospho-Ser136) Antibody二苯胺(DPA)DNA比色定量測定試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10次甘草素()(標準品) Liquiritigenin 578-86-9 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
二氨基苯甲酸(DABA)DNA比色定量測定試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次甘草酸 Glycyrrhizic acid 1405-86-3 質(zhì)量規(guī)格:UV>98%,BR
鋱鹽(terbiumIII)單鏈DNA熒光定量測定試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次甘草酸(標準品) Glycyrrhizic acid 1405-86-3 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
PICO GREEN雙鏈DNA熒光定量測定試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次甘草酸單銨鹽(標準品) Glycyrrhizic acid ammonium salt 53956-04-0 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
RNA比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次甘草酸單銨鹽 Glycyrrhizic acid ammonium salt 53956-04-0 質(zhì)量規(guī)格:UV>97%,無水物,BR
RNA熒光(RiboGreen)定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次甘草酸二銨鹽(標準品) Diammonium Glycyrrhizate 79165-06-3 質(zhì)量規(guī)格:UV≥98%,標準品
通用型糖類總量鐵化物比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次甘草酸二銨鹽 Diammonium Glycyrrhizate 79165-06-3 質(zhì)量規(guī)格:UV≥97%,BR
細胞糖類總量鐵化物比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次橄欖苦苷(標準品) Oleuropein 32619-42-4 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
組織糖類總量鐵化物比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次高麗槐素(標準品) Maackiain 19908-48-6 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
血液糖類總量鐵化物比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次高良姜素(標準品) Galangin 548-83-4 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
體液糖類總量鐵化物比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次高三尖杉酯堿(標準品) Homoharringtonine 26833-87-4 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
植物糖類總量鐵化物比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次高香草酸(標準品) Homovanillic acid 306-08-1 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
糖類總量硫酸-苯酚比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次告達亭苷元 caudatin 38395-02-7 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
糖類總量氨基苯硫酚熒光定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次格列風內(nèi)酯(標準品) Griffonilide 61371-55-9 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
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