操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測定過氧化氫的實(shí)際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準(zhǔn)備樣品:
a,細(xì)胞或組織樣品:取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進(jìn)行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細(xì)胞裂解液,如果有必要需進(jìn)行適當(dāng)勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測定,尿液通常也可以直接用于測定,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi),顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進(jìn)行CAT檢測。
d,血液中的紅細(xì)胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預(yù)冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計(jì)算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)的CAT含量。
3、 CAT檢測:按照下表設(shè)置空白管、自身對照管、測定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測定。樣品的檢測能設(shè)置平行孔。
4、分光光度計(jì)檢測405nm處吸光度,分光光度計(jì)比色杯光徑0.5cm。如果沒有分光光度計(jì),亦可用酶標(biāo)儀檢測,但如果有條件,盡量采用分光光度計(jì)檢測。蒸餾水調(diào)零,讀取各管吸光度值。一般應(yīng)數(shù)小時(shí)內(nèi)檢測完畢。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細(xì)閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱:40%丙烯酰胺(19:1)
規(guī)格:500ml
測試方法:
客戶自備儀器和試劑:
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點(diǎn):
1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案,1小時(shí)即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體英文名稱:phospho-Tau protein(Ser396) 0.1ml
足細(xì)胞特異蛋白抗原PCX/PODXL(Podocalyxin) 0.5mg
熒光素APC標(biāo)記牛IgGBovine IgG/APC 0.1ml
小鼠纖連蛋白FN(Mouse Fibronectin) ELISA Kit 96T
小鼠甲狀腺素T4(Mouse thyroxine) ELISA Kit 96T
DNA損傷結(jié)合蛋白2抗體英文名稱:DDB2 0.1ml 唾液富組蛋白1(HTN1)ELISA試劑盒 HTN1 ELISA Kit
?;拾贝济擋C?/span>2抗體英文名稱:ASAH2 0.2ml 腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G2(ABCG2)ELISA試劑盒 ABCG2 ELISA Kit
血型抗原前體蛋白抗體英文名稱:Blood Group Antigen Precursor 0.2ml 橋粒糖蛋白2(DSC2)ELISA試劑盒 DSC2 ELISA Kit
癌胚抗原抗體英文名稱:CEA 0.1ml 谷氨酸脫羧酶自身抗體IgG(GAD-Ab-IgG)ELISA試劑盒 GAD-Ab-IgG ELISA Kit
豬圓環(huán)病毒Ⅱ型衣殼蛋白英文名稱:capsid protein 0.2ml CC趨化因子5(CCL5/D17S136E/SCYA5)ELISA試劑盒 CCL5/D17S136E/SCYA5 ELISA Kit
羅丹明標(biāo)記小鼠IgMMouse IgM/RBITC 0.3ml
G蛋白結(jié)合蛋白α16/Gα16抗體英文名稱:G protein alpha 16 0.2ml 連續(xù)蛋白(TELE)ELISA試劑盒 TELE ELISA Kit
谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶θ抗體英文名稱:GSTT1 0.2ml 角蛋白4(KRT4)ELISA試劑盒 KRT4 ELISA Kit
高密度脂蛋白抗體英文名稱:HDL 0.2ml 法尼基轉(zhuǎn)移酶β(FNTβ)ELISA試劑盒 FNTβ ELISA Kit
磷酸化活化蛋白激酶B抗體英文名稱:phospho-JunB(Ser259) 0.1ml Polycomb組環(huán)指蛋白4(PCGF4)ELISA試劑盒 PCGF4 ELISA Kit
雙微體2癌基因抗體英文名稱:MDM2 0.1ml
40%丙烯酰胺(19:1)通用型蛋白共沉淀(蛋白A樹脂)試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10次碘化鉀溶液(1/60mol/L(0.1N)) Potassium iodide solution 7681-11-0 質(zhì)量規(guī)格:1/60mol/L(0.1N)
通用型蛋白共沉淀(蛋白G樹脂)試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10次玫紅酸(AR) Rosolic acid 603-45-2 質(zhì)量規(guī)格:AR
GST融合蛋白擴(kuò)增試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10次玫紅酸(指示劑級) Rosolic acid 603-45-2 質(zhì)量規(guī)格:指示劑級
HIS標(biāo)記蛋白擴(kuò)增試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10次草酸鈉容量分析用溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) Sodium oxalate solution for volumetric analysis 62-76-0 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.96%
GST融合蛋白純化試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:5次百里香酚藍(lán)(IND) Thymolblue 76-61-9 質(zhì)量規(guī)格:IND
HIS標(biāo)記蛋白純化試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:5次百里香酚藍(lán)(ACS reagent,95 %) Thymolblue 76-61-9 質(zhì)量規(guī)格:ACS reagent,95 %
不溶性GST融合蛋白溶解試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10次喹哪啶紅 Quinaldine Red 117-92-0 質(zhì)量規(guī)格:AR
TrpE融合蛋白擴(kuò)增試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10次酚酞(98%) Phenolphthalein 28376 質(zhì)量規(guī)格:>98%
GST融合蛋白谷胱甘肽樹脂再生試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次四溴酚藍(lán) Tetrabromophenol blue 4430-25-5 質(zhì)量規(guī)格:IND
HIS 標(biāo)記蛋白Ni-NTA樹脂再生試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次百里香酚酞 Thymolphthalein 125-20-2 質(zhì)量規(guī)格:AR;IND
蛋白樣品樹脂法去內(nèi)試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次釷試劑 Thorin 3688-92-4 質(zhì)量規(guī)格:0.9
大量蛋白樣品樹脂法去內(nèi)試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:5次鈦鐵試劑(AR) Tiron 149-45-1 質(zhì)量規(guī)格:AR
蛋白樣品液相法去內(nèi)試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次鈦鐵試劑(95%) Tiron 149-45-1 質(zhì)量規(guī)格:0.95
大量蛋白樣品液相法去內(nèi)試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:5次四溴酚酞乙酯鉀鹽 TBPE 62637-91-6 質(zhì)量規(guī)格:IND