建議實驗人員全血樣本提取好了應(yīng)該及時離心出血清或者血漿。并要求-70℃條件下保存,如果一個月左右可以開展實驗可以-20℃保存,期間不能反復(fù)凍融。至于凍存后的全血不可以再提取血清、血漿樣本來做elisa的具體原因如下:
1、 全血凍存后解凍,用常規(guī)離心方式提取血清仍然是可以的,唯壹不利的一點是,伴隨凍融的過程,會出現(xiàn)比較嚴重的溶血事件。而*后提取出來的血清能否做elisa,主要取決于溶血程度、你所要檢測的目標(biāo)蛋白的性質(zhì)及你實驗的*終目的。
2、 溶血釋放的胞內(nèi)組分往往容易影響本底,甚至出現(xiàn)假陽性;而蛋白酶的釋放可能導(dǎo)致目的蛋白的降解*終影響結(jié)果;目的蛋白的大小、穩(wěn)定性、特異性(相對抗體而言)又影響其自身與酶標(biāo)板的吸附、自身降解、自身與抗體的結(jié)合率等等。以上各種不確定性因素存在下,如果你只是對血清中某種血清蛋白做定性檢測的話,做elisa應(yīng)該問題不大;若是定量分析的話,從可靠性的角度上看,不建議該做法。