在ELISA實(shí)驗(yàn)中，加樣 一定是繞不開(kāi)的一環(huán)！ELISA測(cè)定操作非常簡(jiǎn)單，一般涉及到標(biāo)本的收集保存、試劑準(zhǔn)備、加樣、溫育、洗板、顯色、結(jié)果判斷和結(jié)果報(bào)告及解釋等方面，其中任一步驟的不當(dāng)都會(huì)影響測(cè)定結(jié)果，且尤以加樣、溫育和洗板等步驟為甚。
ELISA實(shí)驗(yàn)中一般需要 4 次加樣，即加標(biāo)本、加檢測(cè)抗體、加底物和加終止液。
實(shí)驗(yàn)室使用的微量加樣器應(yīng)注意保養(yǎng)并定期校正。ELISA比較敏感，每孔加入液體量誤差會(huì)導(dǎo)致讀數(shù)差別，因此避免儀器帶來(lái)誤差。
加樣前，溶液充分混勻，加樣時(shí)不可90度向孔中滴加液體，否則會(huì)導(dǎo)致液體殘留在吸頭上，加樣不準(zhǔn)確。正確加樣方法應(yīng)為45度，吸頭貼著孔壁和液面的交界處加入。
加樣品時(shí)，單孔用量要求：≥50ul/指標(biāo)，如需要做2個(gè)復(fù)孔則血量≥100ul/指標(biāo)。如果樣本量不充足，具體用量可咨詢您的專屬銷售。
加樣時(shí)速度不可過(guò)快，否則無(wú)法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性。
加樣時(shí)避免液體濺出，如有樣本濺出，應(yīng)用吸水紙輕輕拭干，并做相應(yīng)記錄。
如果移液槍漏氣以至于加樣的量不夠，不能用槍吸出再加，做相應(yīng)記錄實(shí)驗(yàn)。
每次加樣順序一致，尤其底物、終止液順序一致，保證每個(gè)孔顯色時(shí)間相同。加完顯色液后，放入一個(gè)可推拉的抽屜內(nèi)，就可以避光振蕩了。